[发明专利]用于制备载有一种或多种制药学感兴趣物质的红细胞的方法和由此得到的红细胞

说明书

本发明涉及一种用于制备载有一种或多种制药学感兴趣物质的红细胞的方法。本发明还涉及由此得到的装载红细胞和包括所述装载红细胞群的药物组合物及其治疗性应用，特别是在治疗共济失调毛细血管扩张中的治疗性应用。

技术领域

本发明涉及一种用于制备载有一种或多种活性成分的红细胞的方法、由此得到的装载红细胞和包括所述装载红细胞的药物组合物。

本发明还涉及包括所述红细胞的药物组合物及其治疗性应用，特别是在治疗共济失调毛细血管扩张中的应用。

背景技术

血红细胞，也被称为红细胞，是一种能够携带并释放到循环中和/或将活性成分有效地靶向靶位点的现有技术中的药物载体。使用红细胞作为药物载体的优点主要在于活性成分可以在循环中保持数天或数周的时间，且无论如何比通常情况下使用口服或静脉注射或者由脂质体或其他药物载体介导的缓释系统可以保持更长的时间。此外，一旦这些载体已经完成了其携带活性成分的任务，它们将被通过用于消除肝脏和脾脏中的天然红细胞的生理通路从循环中去除。

已经提出了多种方法以将活性成分或造影剂封装在人类或哺乳动物的血红细胞中以实现生物医学和临床用途。

特别地，专利EP0882448首次描述了将药物以足以获得所期望药理效应的浓度封装在红细胞中的方法。在上述现有专利中描述的方法包含一系列可概括为如下的操作步骤：

-将红细胞溶胀的第一步，

-使经过溶胀的红细胞裂解以将所述红细胞膜上的孔打开足够大从而使感兴趣的活性成分跨越到细胞内空间的第二步，

-对经过裂解的红细胞进行浓缩步骤，

-封装步骤，其中红细胞开始与活性成分接触，随后对红细胞进行关闭/再封闭以达到将活性成分捕获在血红细胞中的目的。

刚刚描述的方法有可能获得载有活性成分且适于用作药物载体的红细胞。目前，对于该领域的专家来说，涉及将药物封装在在红血细胞中的最有效的方法是上述方法。

然而，在使用这种方法时，观察到在上述专利(EP0882448)中所定义的操作条件中对经过裂解的红细胞进行浓缩的步骤中，这些经过裂解的红细胞受到机械应力，该机械应力可能使接下来对装载红细胞进行重建相当困难。

在用于将活性成分封装在红细胞中的各种已知的技术中，在专利EP1773452-B1中所述的方法提供了工艺参数的修正，如改变裂解液的流速和调节其渗透压，以便当患者的渗透脆弱性(或球状渗透阻力)变化时获得活性成分的封装的再现性。

本发明的范围是进一步提高EP 0882448中所述的方法取得的已经令人满意的结果以获得一种用于将制药学感兴趣物质封装在红细胞中的改进方法。

发明内容

本发明涉及一种用于制备载有一种或多种制药学感兴趣物质的红细胞的方法，该方法与已知的现有技术中所描述的相同的方法相比，在几个方面有所提高。

特别地，该方法包括一系列操作步骤，其以在细胞裂解步骤前进行红细胞的浓缩步骤为特征，裂解步骤必须使药物活性分子被封装在红细胞中。更确切地说，该裂解步骤是在与包括待封装的物质的溶液接触的步骤中进行。

本发明的方法提供了使用适当的低渗溶液使起始红细胞经过两个相继的细胞溶胀步骤而不裂解；实际上，这些步骤取代了根据现有技术的相同方法的溶胀步骤和裂解步骤。

因此，本发明的目的是一种用于制备载有一种或多种制药学感兴趣物质(如活性成分)的红细胞的方法，包括以下步骤：

a)用第一低渗溶液使红细胞溶胀，

b)用比所述第一低渗溶液更低渗的第二低渗溶液使步骤a)得到的红细胞进一步溶胀，而没有达到裂解，

c)浓缩步骤b)得到的红细胞；