[发明专利]微囊泡及其制造方法

权利要求书

1.一种用于制造微囊泡的方法，所述微囊泡包含：转基因产物和/或包含转基因的慢病毒RNA，所述方法包括以下步骤：

培养已在体外使用慢病毒载体导入转基因的细胞以胞外释放包含所述转基因产物和/或所述包含转基因的慢病毒RNA的所述微囊泡，其中所述慢病毒载体是至少一种结构蛋白基因缺陷的并且在慢病毒基因组序列中包含处于端粒酶逆转录酶(TERT)基因启动子控制下的转基因；以及

收集所释放的微囊泡；

其中所述端粒酶逆转录酶(TERT)基因启动子是人类TERT基因启动子；并且

前述导入转基因的细胞是人类细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞不具有所述至少一种结构蛋白基因。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述慢病毒载体是env基因缺陷的。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述人类TERT基因启动子由SEQ ID NO:1的核苷酸序列组成。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述慢病毒载体是：

(i)包含慢病毒基因组序列的RNA载体，

(ii)编码包含慢病毒基因组序列的RNA的DNA载体，或

(iii)携带包含慢病毒基因组序列的RNA的病毒颗粒。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述慢病毒基因组序列是HIV基因组序列。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述慢病毒载体包含为肿瘤抑制基因的所述转基因。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述肿瘤抑制基因是PTEN或p16基因。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述慢病毒载体包含编码shRNA的所述转基因。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述shRNA靶向编码细胞增殖调控因子的基因。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述细胞增殖调控因子是CDC6。

12.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述细胞是肾衍生的细胞。

13.一种微囊泡，所述微囊泡包含：转基因产物和包含转基因的慢病毒RNA，其中所述微囊泡由根据所述权利要求1至12的任一项所述的方法制造，并且其中所述慢病毒RNA在所述转基因的5’上游包含TERT基因启动子的RNA序列。

14.一种基因转导的方法，所述方法包括：使靶细胞与根据权利要求13所述的包含所述转基因产物和所述包含转基因的慢病毒RNA的所述微囊泡在体外接触以融合它们，从而使所述转基因导入到所述细胞内。

15.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求13所述的微囊泡。

16.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求13所述的微囊泡。

17.根据权利要求16所述的药物组合物，所述药物组合物用于治疗癌症。

18.根据权利要求17或16所述的药物组合物，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体。

19.一种用于制备包含微囊泡的药物组合物的方法，所述微囊泡包含转基因产物和/或包含转基因的慢病毒RNA，其中所述方法包括通过根据权利要求1-12的任一项所述的方法制备所述微囊泡以及制备所述药物组合物。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述药物组合物用于施用至患有癌症的患者。