[发明专利]艰难梭菌素及其使用方法

说明书

授权信息

本发明根据国家卫生研究院的国家变态反应和感染疾病学院 (NationalInstituteofAllergyandInfectiousDiseases)授予的拨款号 R43AI098186-01在政府支持下完成。美国政府对本发明享有某些权 利。

序列表

本申请含有以ASCII格式以电子方式提交的序列表并且在此以 引用的方式整体并入。在2014年3月6日创建的所述ASCII副本的 名称是CF210341_SL.txt并且大小是476,921个字节。

发明领域

本申请总体上涉及足以产生细菌素(且更具体地，特异性地杀灭 艰难梭菌(Clostridiumdifficile)的R型高分子量细菌素)的基因簇的鉴 别和分离，以及改变其杀菌特异性、产生和使用其的方法。

发明背景

艰难梭菌是专性厌氧、产芽胞的革兰氏阳性细菌，其对于人及其 它哺乳动物是众所周知的病原体(Bartlett等人,1977；Bartlett等人, 1979；Keel等人,2007；Sunenshine&McDonald,2006)。在低密度下， 艰难梭菌可无害地驻留在哺乳动物胃肠(GI)道中，但一旦扩张(经常是 由于施用减少共生细菌的抗生素)，艰难梭菌细菌便产生足以引起从 轻度腹泻疾病到特征性伪膜性结肠炎的一系列疾病的外毒素，其是危 及生命的，特别是对于老年人及其他具有显著并发症的人(Bartlett, 2002)。

因为由这种病原体形成的芽孢广泛地传播且在医院和长期护理 机构中难以根除或灭活，所以患者由艰难梭菌定殖的可能性在他们进 入此类机构之后急剧地提高(Bartlett,2007)。实际上，最近已充分记 载了相对较新的艰难梭菌菌株，其是艰难梭菌的超毒性产毒菌株 BI/NAP1/027，它在大规模的爆发环境里引起严重疾病(Spigaglia等人, 2002；Pépin等人,2004；McDonald等人,2005；Muto等人,2005；Loo 等人,2005；Belmares等人,2009)。艰难梭菌相关疾病(CDAD)在先前 处于低风险下的儿童中的发病率也大幅度地提高(Benson等人,2007； Zilberberg等人,2010)。

通过施用抗生素在无症状的载体或定殖的受试者中预防地清除 病原体由于诱发艰难梭菌相关疾病的高风险而是高度禁忌的。

由革兰氏阴性细菌制造的R型细菌素已经有所描述并且已由杀 灭其它竞争性革兰氏阴性菌株(甚至在一些情况下革兰氏阴性细菌的 其它种或属)的此类细菌来配置(Kageyama等人,1964；Kageyama等 人,1964a；Kingsbury,D,1966；Blackwell和Law,1981；Blackwell等 人,1982；Campagnari等人,1994；Strauch等人,2001；Jabrane等人, 2002)。已经描述了R型脓菌素的基板附着区(BPAR)与异源受体结合 域(RBD)的融合，从而使得产生对革兰氏阴性细菌具有新型杀菌特异 性的新型R型脓菌素(Williams等人,2008；Scholl等人,2009)。