[发明专利]免疫原性肽缀合物及以之诱导抗流感治疗性抗体应答的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请是2013年3月14日提交的美国顺序号13/828,988的部分继续申请，其通过引用以其整体结合到本文中。

发明领域

本发明涉及免疫原性流感血凝素A2(HA2)来源的肽缀合物和使用所述缀合物诱导针对流感病毒的特异性抗体应答的方法。

序列表并入

本申请的生物学序列信息包含于与本申请一起提交的ASCII文本文档中，所述ASCII文本文档的文件名为“TU-271-5-SEQ.txt”，创建于2013年3月14日，文件大小为29,368字节，其通过引用结合到本文中。

发明背景

血凝素(HA)是流感病毒(正黏病毒)的包膜蛋白，并且是原型RNA病毒I类融合蛋白。HA在感染细胞中作为前体蛋白HA0产生，所述HA0被蛋白水解裂解成2种蛋白质，称为HA1和HA2。HA2含有氨基端疏水结构域，被称为融合肽，它在血凝素前体蛋白裂解时被暴露出来。除融合肽以外，逆转录病毒跨膜蛋白还含有几个与HA2已知结构一样的结构特征，包括延长的氨基端螺旋(N-螺旋，通常为“七残基重复序列”或“亮氨酸拉链”)、羧基端螺旋(C-螺旋)和跨膜结构域近端的芳族基序。这5种结构域中至少4种的存在将病毒包膜蛋白界定为I类融合蛋白。

图1显示6个I类病毒家族的融合蛋白的6个已鉴定的结构域。融合蛋白起源于疏水融合肽，终止于锚肽，并整合了延长的氨基端α-螺旋(N-螺旋，通常为“七残基重复序列”或“亮氨酸拉链”)、羧基端α-螺旋(C-螺旋)和有时病毒体包膜近端的芳族基序。第6个结构域，本文称为融合起始区(FIR)，公开于美国专利号7,491,793和美国专利号8,222,204(属于Garry和Wilson)，它们的每一个通过引用以其整体结合到本文中。

存在多个甲型流感病毒亚型。各病毒亚型包含包埋在病毒的脂质膜包膜中的两种糖蛋白的一种特定形式组合。两种界定亚型的糖蛋白为血凝素HA和神经氨酸酶(NA)。有17种已知的HA变体，分别被称为H1至H17，并有9种已知的神经氨酸酶变体，被分别称为N1至N9。各个病毒亚型的特定特征分别在于其血凝素和神经氨酸酶变体号。例如，甲型流感亚型H3N2为猪流感，亚型H5N1为禽流感。

每年大约10-20%的美国人口罹患季节性流感。虽然大多数个体在1-2周内从流感中恢复，但是极年幼者、老年人和患有慢性医学病况的人可发展出流感后肺炎和其它致死并发症。流感的致病物质是流感病毒，通过分段的病毒基因组的再分布和突变过程容易发展出新毒株的正黏病毒。

I类病毒的FIR是参与病毒包膜-宿主细胞膜融合的病毒融合包膜蛋白的区域，所述融合是结合宿主细胞膜的病毒籍以打断宿主细胞膜的完整性以将病毒的遗传物质注入宿主细胞中的过程。该过程包括病毒包膜和宿主细胞膜的合并，这是由病毒融合蛋白(例如在流感病毒的情况下为血凝素)介导的，因此将宿主细胞的内部暴露于病毒的内部。如上述美国专利号7,491,793和美国专利号8,222,204(属于Garry和Wilson)所公开的一样，包含FIR区段或由FIR区段组成的相对短的肽可与病毒融合蛋白结合，并干扰融合发生所需要的构象变化。所述肽因此防止宿主细胞被病毒感染，尽管事实是病毒仍可与宿主细胞膜的表面结合。因此，FIR肽通过与传统疫苗治疗相比完全不同的机制抑制病毒感染性，传统疫苗治疗一般包括产生防止病毒与宿主细胞结合的抗体，而不是干扰包括病毒融合机制本身的生物化学事件。

甲型流感病毒高毒力毒株可产生流行病和大流行病。近年来，出现了能够引起高死亡率的甲型禽流感病毒亚型H5N1的高致病性毒株。应对由流感病毒造成的对公共健康和作为生物恐怖活动潜在物质二者的威胁是极优先考虑的事。因此，有研发控制季节性流感及大流行性流感和武器化流感的威胁增加的治疗组合物和方法的持续需要。本文所述的肽缀合物、抗体致力于这些需要。

发明概述