[发明专利]新检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及癌症和癌症检测领域。更具体地，本发明涉及对敏感指征例如肿瘤细胞活性的新检测方法。根据本发明的方法可用于对上皮源性癌，例如非小细胞肺癌，和膀胱癌患者的管理。

背景技术

在工业世界，癌症是主要致死原因中的一个。为了改善病人护理，当前致力于发现关于预测、治疗反应的早期迹象和疾病进程的其它信息。为此感兴趣的工具是癌症生物标记的使用，即表明体内存在癌症的物质。生物标记是肿瘤或人体对存在的癌症的特异反应分泌的分子。理想的是，这种生物标记能够在非侵入式收集的生物液体如尿液、血液或血清中检测。

人们感兴趣的一个领域是肺癌，它是世界范围内最普遍和最致命的癌症疾病。肺癌致死的人比结肠、乳腺和前列腺癌的总和还多(WHO统计)。大约80-85％的肺癌患者有非小细胞组织(NSCLC)。非小细胞肺癌(SCLC)占所有肺癌情况的约15-20％。大部分患者具有处于晚期且无法手术的疾病。对于早期阶段的NSCLC，切除作为仅有的有疗效的治疗方法仍然是重要的。过去的十年间，人们广泛研究了肿瘤标记物在肺癌中的价值。已经发现的对肺癌具有临床重要性的最普遍的生物标记是CEA、CYFRA、TPA、TPS和NSE。然而，灵敏性和专一性的缺乏限制了癌症生物标记在对肺癌进行检查和早期诊断中的应用。对于疾病的预后评价和过程检测，癌症生物标记显得更加有效。

所有真核细胞具有已知为中间丝的细胞质细胞骨架结构。细胞骨架网络负责细胞的机械完整性且在细胞过程如细胞分裂、运动和细胞间接触中至关重要。目前，已经确认了超过20种不同的细胞角蛋白，其中在简单上皮细胞中细胞角蛋白8、18和19是最充足的。细胞角蛋白是上皮细胞特有的且细胞角蛋白模式在正常细胞转化成恶性细胞过程中通常保留下来。

检测细胞角蛋白8、18和19上限定的表位的固相两位点免疫放射分析(IRMA)是商业上可获取的(IDL Biothch，Bromma Sweden)，商标为将捕获抗体，单克隆抗体6D7(CK8)、3F3(CK18)和IDLC4(CK19)涂覆于塑料珠上。分析中使用多克隆¹²⁵I-标记抗体作为示踪剂。用γ计数器检测放射活性且放射活性正比于细胞角蛋白抗原片段的浓度。MonoTotal是设计为进行患者血清检测的定量检测。MonoTotal作为预后标记对于诊断、预后，和对于监控患者的治疗是有价值的。通过跟踪患者的重复MonoTotal检测，医生能够获取有关肿瘤细胞活性的关键信息。变化的MonoTotal标记水平表明肿瘤细胞活性发生变化，且提高的水平指向肿瘤的存在。在患者管理和随访中该信息被认为特别重要，其中血液样品可用于监测治疗和对肿瘤复发的早期检测。当疾病仍限制于肺部时大约15％的肺癌患者被确诊，且早期检测对于增加生存的可能是至关重要的。通过使用MonoTotal，医生可以得到疾病过程的指征信息，其以肿瘤细胞活性而不是传统的肿瘤负荷检测来测定。Mono Total能够向医生提供对诊断、建立预后、治疗监测和患者随访中可靠的辅助信息。

根据已公开研究，MonoTotal显现出与患者的临床反应非常相关。相较于肺癌患者中的Cyfra，MonoTotal具有更高的灵敏度。在肺癌诊断中，不依赖于组织分型，MonoTotal的整体灵敏度是约70-75％，且特异性为95％。非小细胞肺癌(NSCLC)的灵敏度更高。MonoTotal与肿瘤细胞活性和疾病程度非常相关。此外，MonoTotal可预测疾病进程(无病期间和整体存活率)，且在NSCLC随访中是复发的早期标志。MonoTotal中的变化通常早于传统成像方法的复发的检测。由于血清中细胞角蛋白的半衰期小于一天，所以在几天内能够进行对治疗反应的检测。MonoTotal对于NSCLC是比程序化临床实践中目前使用的其他生物角蛋白标记更灵敏的肿瘤标记。

另一个感兴趣的领域是膀胱癌，在世界范围内其是男性和女性中常见的癌症。超过70％的情况都是非肌层浸润性膀胱癌，但是很多患者发展成肌层浸润性膀胱癌或转移性疾病。为提高对膀胱癌的预后，使用有效的方法进行早期检测和常规随访对于患者而言是重要的。

非浸润性膀胱癌检测具有很多潜在应用，如帮助诊断复发，降低对侵入性检测的需求和检测患者是否落入高风险范畴。免疫检测(IDL Biotech)是一种非侵入性检测。