[发明专利]干细胞培养用培养基有效
申请号: | 201480030956.4 | 申请日: | 2014-05-30 |
公开(公告)号: | CN105283541B | 公开(公告)日: | 2019-02-19 |
发明(设计)人: | 栗山阳子;千田将;安东裕未;吉田智美;佐藤春奈;江岛大辅;藤井孝吉;伊达雅代;北泽学 | 申请(专利权)人: | 味之素株式会社 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/073;C12N5/0735;C12N5/10 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 郑天松 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 培养 培养基 | ||
1.使干细胞在分化细胞所占的比例保持在至多10%以内的状态的同时增殖用的培养基,其含有长链脂肪酸负载量降低的白蛋白,其中白蛋白的长链脂肪酸负载量是0.1mg/g~0.65mg/g。
2.权利要求1所述的培养基,其中分化细胞通过碱性磷酸酶染色的确认来判断。
3.权利要求1所述的培养基,其中长链脂肪酸负载量的降低是由脱脂肪酸处理所致。
4.权利要求3所述的培养基,其中脱脂肪酸处理是活性炭处理。
5.权利要求1所述的培养基,其中长链脂肪酸是选自油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、亚麻酸及花生四烯酸的至少1种。
6.权利要求1所述的培养基,其中白蛋白是人血清来源白蛋白。
7.权利要求1所述的培养基,其中干细胞是多能性干细胞。
8.权利要求7所述的培养基,其中多能性干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)或人工多能性干细胞(iPS细胞)。
9.权利要求1~8之任一项所述的培养基,其用于单细胞接种的细胞的培养。
10.使干细胞在分化细胞所占的比例保持在至多10%以内的状态的同时增殖的方法,其包括将所述细胞在权利要求1所述的培养基中培养的工序。
11.权利要求10所述的方法,其中干细胞是多能性干细胞。
12.权利要求11所述的方法,其中多能性干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)或人工多能性干细胞(iPS细胞)。
13.权利要求10~12之任一项所述的方法,其中所述干细胞是单细胞接种的细胞。
14.选择适于向使干细胞在分化细胞所占的比例保持在至多10%以内的状态的同时增殖用的培养基中添加的白蛋白的方法,其包括测定长链脂肪酸负载量,挑选长链脂肪酸负载量降低的白蛋白的工序,其中白蛋白的长链脂肪酸负载量是0.1mg/g~0.65mg/g。
15.使干细胞在分化细胞所占的比例保持在至多10%以内的状态的同时增殖用的培养基的制造方法,其特征在于,对白蛋白进行脱脂肪酸处理而制备长链脂肪酸负载量降低的白蛋白,将制备的白蛋白添加到培养基,其中白蛋白的长链脂肪酸负载量是0.1mg/g~0.65mg/g。
16.权利要求15所述的方法,其中脱脂肪酸处理是活性炭处理。
17.权利要求16所述的方法,其中活性炭处理以每白蛋白重量使用30~60重量%的活性炭量而进行。
18.权利要求16所述的方法,其中活性炭处理在pH6.7~7.3进行。
19.权利要求16所述的方法,其中活性炭处理在pH3.7~4.3进行。
20.权利要求15所述的方法,其中长链脂肪酸是选自油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、亚麻酸及花生四烯酸的至少1种。
21.权利要求15所述的方法,其中白蛋白是人血清来源白蛋白。
22.权利要求15所述的方法,其中干细胞是多能性干细胞。
23.权利要求22所述的方法,其中多能性干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)或人工多能性干细胞(iPS细胞)。
24.权利要求15~23之任一项所述的方法,其中所述培养基用于单细胞接种的细胞的培养。
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