[发明专利]用于测定铝盐制备物的内毒素含量的方法

权利要求书

1.用于测定用于药物中(具体而言用作疫苗中的佐剂)的铝盐制备物中的内毒素含量的方法，其包括以下步骤：

a.混合所述铝盐与解吸缓冲液，由此从所述铝盐解吸任何内毒素；

b.将所述铝盐与所述内毒素分离；和

c.测量内毒素的量。

2.用于测定用于药物中(具体而言用作疫苗中的佐剂)的铝盐制备物中的内毒素含量的方法，其包括以下步骤：

a.混合所述铝盐与解吸缓冲液，由此从所述铝盐解吸任何内毒素；

b.离心混合物，由此将所述铝盐与所述内毒素分离；和

c.测量上清液的内毒素含量。

3.用于测定用于药物中(具体而言用作疫苗中的佐剂)的铝盐制备物中的内毒素含量的方法，其包括以下步骤：

a.混合所述铝盐与解吸缓冲液，由此从所述铝盐解吸任何内毒素；

b.离心混合物，由此将所述铝盐与所述内毒素分离；

c.将上清液转移至无致热原容器；和

d.测量所述上清液的内毒素含量。

4.根据任一前述权利要求的方法，其中以1:9至9:1，例如2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:2或8:2(具体而言3:7、4:6、5:5、6:4、7:3之间，具体而言4:6、5:5和6:4)的比率混合所述铝盐制备物和解吸缓冲液。

5.根据任一前述权利要求的方法，其中在混合之后和分离(具体而言离心)之前孵育(具体而言无搅拌)所述混合物(具体而言持续大于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24小时，具体而言小于96或72小时，例如孵育期为1至96小时、5至72小时、10至48小时、15至36小时或20至28小时)。

6.根据权利要求5的方法，其中在室温(约22℃)进行所述孵育(具体而言用于测定磷酸铝的内毒素的方法中使用)。

7.根据权利要求5的方法，其中在大于30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃进行所述孵育(具体而言用于测定氢氧化铝的内毒素的方法中使用)。

8.根据任一前述权利要求的方法，其中所述混合物在步骤a)之后搅拌多于30秒、40秒、50秒、1分钟、1分钟30秒或2分钟。

9.根据任一前述权利要求的方法，其中所述解吸缓冲液包含盐(具体而言Na₂HPO₄[具体而言15至20%])和金属螯合剂(具体而言EDTA[具体而言0.2至0.3%])。

10.根据任一前述权利要求的方法(具体而言用于测定氢氧化铝的内毒素的方法中使用)，其中所述解吸缓冲液包含其他盐(具体而言NaCl)。

11.根据任一前述权利要求的方法，其中所述解吸缓冲液(具体而言用于测定磷酸铝的内毒素的方法中使用的解吸缓冲液)具有等于或大于pH5.5，例如约pH7至pH9的pH。

12.根据任一前述权利要求的方法，其中所述解吸缓冲液(具体而言用于测定氢氧化铝的内毒素的方法中使用的解吸缓冲液)具有等于或大于pH9.5，例如pH9.5至pH10.5的pH。

13.根据任一前述权利要求的方法，其中所述解吸缓冲液在约30℃至45℃、35℃至40℃、36℃至38℃或约37℃的温度。

14.根据任一前述权利要求的方法，其中所述解吸缓冲液在大于35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃或65℃的温度。

15.根据任一前述权利要求的方法，其中所述解吸缓冲液基本上无内毒素和/或是无菌的。

16.根据任一前述权利要求的方法，其中以100至1500xg离心所述混合物。

17.方法，其中通过鲎变形细胞溶解物(LAL)测定(具体而言通过动态显色法)测量/定量内毒素含量。

18.根据任一前述权利要求的方法，其中所述铝盐是磷酸铝、氢氧化铝或其组合。

19.质量控制测定，其包括权利要求1至18中任一项的方法。