[发明专利]双重选择性PI3δ和γ激酶抑制剂

说明书

本申请要求2013年6月7日提交的印度专利申请第2501/CHE/2013号以及2013年12月3日提交的印度专利申请第5567/CHE/2013号的权益，每篇申请均据此以引用的方式全文并入。

发明领域

本发明提供双重delta(δ)及gamma(γ)PI3K蛋白激酶调节剂、其制备方法、含有其的药物组合物以及用其治疗、预防和/或改善Pi3K激酶介导的疾病或病症的方法。

发明背景

磷酸肌醇-3激酶(PI3K)属于一类细胞内脂质激酶，所述激酶磷酸化磷酸肌醇脂质(PI)的肌醇环的3位羟基，从而产生脂质第二信使。虽然α及β同种型的普遍分布，但δ和γ的表达只限于循环造血细胞及内皮细胞。与PI3K-α或β不同，缺乏γ或δ表达的小鼠不显示任何不利的表型，表明这些特定同种型的靶向不会导致明显的毒性。

最近，已提出将磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)途径的靶向抑制剂作为免疫调节剂。此兴趣源于以下事实：PI3K途径在免疫细胞信号传导中主要经由产生一种膜结合的第二信使磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸(PIP3)发挥多重功能。PIP3将蛋白质募集至脂质双层的细胞质侧，包括蛋白激酶及GTP酶，引发在免疫细胞黏着、迁移以及细胞-细胞通讯的调节中重要的下游信号传导级联的复杂网络。

4种I类PI3K同种型在其组织分布方面显著不同。PI3Kα和PI3Kβ是普遍存在的且是受体酪氨酸激酶(RTK)的经活化的下游，而PI3Kδ和PI3Kγ主要限于造血及内皮细胞且分别是RTK和G蛋白偶联受体(GPCR)的经活化的下游。小鼠遗传学研究已揭露PI3Kα和PI3Kβ对正常发育而言必不可少，而PI3Kδ和/或PI3Kγ的损失得到具有选择性免疫缺陷的可存活的后代。

PI3Kδ和PI3Kγ的表达模式及功能已使得对开发PI3Kδ/γ抑制剂作为用于以下许多疾病的药剂产生极大的兴趣，所述疾病包括类风湿性关节炎、过敏、哮喘、慢性阻塞性肺病及多发性硬化症(Hirsch等人，Pharmacol.Ther.，118，192-205，2008；Marone等人，Biochim.Biophys.Acta.，1784，159-185，2008；Rommel等人，Nat.Rev.Immunol.，7，191-201，2007；Ruckle等人，Nat.Rev.DrugDiscov.，5，903-918，2006)。使用药理学方法及遗传学方法两者的研究已显示该两种同种型经常显示彼此协同的相互作用(Konrad等人，J.Biol.Chem.，283，33296-33303，2008；Laffargue等人，Immunity，16，441-451，2002)。举例而言，在肥大细胞中，PI3Kδ对响应于Fc-受体的IgE交联的去颗粒而言必不可少(Ali等人，J.Immunol.，180，2538-2544，2008)，但PI3Kγ在放大该反应中发挥重要作用(Laffargue等人，Immunity，16，441-451，2002)。类似作用已见于其它细胞功能中，包括淋巴细胞归巢及嗜中性粒细胞呼吸爆发，其中PI3Kγ发挥关键作用且PI3Kδ放大每个过程。PI3Kδ和PI3Kγ的非冗余但相关的作用使得难以确定两种同种型(单独或组合)中的哪种在特定炎症性病症中得以最佳靶向。使用缺乏PI3Kδ和/或PI3Kγ或表达PI3Kδ和PI3Kγ的激酶-死变体的小鼠的研究在理解其作用方面是有价值的工具。举例而言，PI3Kδ敲除小鼠显示出降低的嗜中性粒细胞趋化性、减少的抗体产生(T细胞依赖性和非依赖性两者)(Jou等人，Mol.Cell.Biol.，22，8580-8591，2002)、减少数量的成熟B细胞(Clayton等人，J.Exp.Med.，196，753-763，2002；Jou等人，Mol.Cell.Biol.，22，8580-8591，2002)、以及响应于抗IgM在其增殖方面的减少(Jou等人，2002)。此表型在PI3Kδ激酶-死变体中有复制且使用PI3Kδ选择性抑制剂时，伴随减少数量的肥大细胞及肥大细胞增殖以及减弱的过敏反应。PI3Kγ敲除含有较大数量但较小响应性的嗜中性粒细胞、较小数量且较小响应性的巨噬细胞，并且树突细胞呈现减少的肥大细胞去颗粒(Laffargue等人，2002)、较高比率的CD4+与CD8+T细胞)、增加的胸腺细胞凋亡、CXCR3对活化T细胞减少的诱导以及减弱的心肌收缩力。对心脏组织的后一种作用是对于以PI3Kγ抑制剂向患者长期给药的担忧。然而，此问题在当PI3Kγ激酶-死变体(其更好地模拟激酶的抑制而非蛋白质的损失)显示类似的免疫细胞表型时得以极大地缓和，但重要的是没有心脏缺陷。心脏作用在后来显示系由于支架作用而非PI3Kγ的催化活性导致。双重PI3Kδ/PI3Kγ敲除是可行的但在T细胞发育及胸腺细胞存活方面呈现出严重缺陷。PI3Kγ敲除/PI3Kδ激酶-死亡组合产生类似表型，表明至少在免疫系统内部，PI3Kδ的作用或许仅是催化作用。使用敲除及激酶死亡小鼠解释研究可具有挑战性，此是由于所述模型仅提供免疫系统的稳态图片，缺乏暂时的及剂量控制，并且不允许充分了解动态免疫反应将如何对可逆性抑制做出反应。具有变化型态的选择性抑制剂(PI3Kδ、PI3Kγ及PI3Kδ/γ)为白细胞信号传导研究所必需的，以便评定每种PI3K对免疫细胞活化的相对贡献(Olusegon等人，Chemistry&Biology，1，123-134(2010)，包括其中所引用的参考文献)。