[发明专利]交联透明质酸的方法，制备可注射水凝胶的方法，得到的水凝胶，得到的水凝胶的用途

说明书

本发明的目的是：

-用于交联透明质酸，或它的一种盐，和任选的其他生物相容的聚合物的方法，

-用于制备根据所述交联方法获得的可注射的水凝胶的方法，

-根据所述交联方法得到的水凝胶，和

-根据所述交联方法得到的水凝胶在美学和医学领域中的用途。

透明质酸是通过由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰基葡萄糖胺(N-actetyl glucosamine)。结构是线性的且不具有任何物种特异性。透明质酸广泛分布在人和动物生物体内，在其中它实现了许多生物学功能，例如水合作用水平的控制或流体或组织粘弹性的维持。尤其是发现它在眼睛的滑液流体、玻璃体和在真皮中有高浓度。一个70千克的人大约有15克透明质酸，其中一半是含在皮肤中且该量随着年龄增长而下降。

透明质酸凝胶是已知的且已被用在美学和医学的广泛领域许多年的。这些凝胶尤其通常被注入：

-眼睛，在眼科手术中，以维持眼内空间和保护眼的组织，

-连接点，在关节的情况下，用于补充不充足的滑膜液和暂时恢复所述生物流体的软骨保护性能，

-注入或在皮肤下，以填充皱纹或增加脸部或身体的某些区域的体积。

透明质酸在生物体内半衰期短(小于1周)。在美学和医学的许多应用的情况下，所施用的可注射水凝胶包含通过交联稳定的透明质酸，所述交联给出显著增加该多糖在体内的寿命(也称为存在期)并因此增加所注射产品效果的持续时间的可能性。因此，借助于通过交联的该修饰，基于交联的透明质酸的水凝胶具有例如在数月的时间内填充皱纹的能力。

为了提高基于透明质酸的可注射水凝胶的体内存在期，本领域技术人员意识到他/她可增加透明质酸的交联度；但这种分子修饰使凝胶的粘度增加并因此使将其通过针挤出和后续将该凝胶注射入执业医生所希望的区域。这必然意味着：

-或者限制透明质酸的交联度并因此凝胶在体内的存在期，目的是具有保持满意的推顶力，

-或使用以较大直径的针以能够减少通过该针挤出凝胶所需的推顶力，这对于被治疗的患者在注射区域产生更大的疼痛和更大的创伤(瘀斑，红色斑点，炎症，水肿，……)。

已经提出了许多解决方案用于克服该问题，工作者力图提供具有合适存在期和黏度性能并因此通过针挤出凝胶的令人满意水平的可注射制剂。提议可由如下实例组成：

-基于交联透明质酸颗粒的制剂，所述交联透明质酸颗粒是通过将交联的凝胶通常是通过研磨分裂为颗粒得而到；多种制备方法已被描述用于得到该类型的制剂，如申请WO97/04012的案例，

-基于含不同交联成分(crosslinking identities)的交联透明质酸的制剂，来自申请WO 2005/085329中描述的特定的制备方法。

-基于交联透明质酸的制剂，含不彼此交联即不通过共价键彼此连接的交联凝胶混合物；这些制剂根据在FR 2924615中描述的特定的制备方法得到，和

-基于交联透明质酸的制剂，由与交联的透明质酸基质交联在一起的交联的透明质酸颗粒组成；这些制剂根据申请EP 2011816或申请US 2010/0028435制备。

然而，这些解决方案并不完全令人满意。

申请WO 97/04012描述了一种特定的制备方法，给出得到基于颗粒形式的多糖(其可为透明质酸)的可能性。基于交联的透明质酸的颗粒凝胶，在文献中也被称为“双相凝胶”，其特征是存在分散在非交联的透明质酸溶液中的直径约200微米至大于1000微米的颗粒，这给出有助于通过润滑现象促进喷射的可能性。这些凝胶不完全令人满意，因为通过针挤出凝胶是不规则的，特别是具有含大直径颗粒的产品；其中起载体作用的基于非解交联透明质酸的溶液在体内被迅速再吸收，这涉及所需效果的至少部分损失(特别是在注射致力于产生体积的产品后接下来的数天内的填充损失)；并且最后相比较于基于不含任何颗粒——其促进对外来体的响应和/或在治疗区域的机械作用下产生这些粒子迁移——的透明质酸的凝胶，产品的安全性不太好(即更高水平的副效应)。

申请WO 2005/0853描述了一种特定的制备方法，其特征在于引发确定量的至少一种聚合物(可为透明质酸)交联的步骤，和然后通过在具有反应混合物稀释物的溶液中添加额外量的分子量大于500,000Da的聚合物(可为透明质酸)以降低聚合物在溶液中的整体浓度同时使交联反应继续。此溶液不给予有效交联透明质酸的可能性。确实，额外量的聚合物添加伴随着稀释并因此降低反应混合物的透明质酸浓度。透明质酸链和交联剂之间接触的概率因此下降且交联反应不是很有效。