[发明专利]治疗心肌病的基因治疗载体

说明书

技术领域

本发明涉及一种基因治疗载体，该基因治疗载体用于治疗或预防对其有需要的主体的肥厚型心肌病。本发明的基因治疗载体包括编码心脏肌节蛋白的核酸序列和与所述核酸序列可操作地连接的心肌细胞特异性启动子。本发明还涉及一种包含上述基因治疗载体的细胞。本发明还提供了药物组合物，该药物组合物包括上述基因治疗载体和/或含上述载体的细胞。另一方面，本发明涉及一种通过将本发明的基因治疗载体引入需要治疗的主体体内，来治疗或预防主体的肥厚型心肌病的方法。

背景技术

虽然在由环境因素(诸如尼古丁、高胆固醇血症或糖尿病)引起的心脏疾病的预防以及在心脏病症的对症治疗中取得了相当大的进展，但仍然需要能改善对遗传性心肌病的治疗的方法。遗传因素造成的心肌病是肥厚型心肌病(HCM)、扩张型心肌病(DCM)和致心律失常型右室心肌病(ARVC)。

HCM是最普遍的心肌病，其特征是，在没有另一心脏病或全身性疾病(自身能在给定患者中明显产生一定程度的肥厚)的情况下，原因不明地出现左心室肥厚。HCM与收缩最初正常，但舒张功能受损相关(Elliottetal.,2008,EurHeartJ29:270-276；Gerschetal.,2011,JThoracCardiovascSurg142:e153-203)。HCM具有特别高的患病率，在普通人群中的患病率约为1:500(Maronetal.,1995,Circulation92:785-789)，并且是导致年轻人，尤其是运动员发生突发心脏死亡的首要原因。虽然HCM是一种危及生命的疾病，但迄今为止还不能进行治愈性治疗(Carrieretal.,2010,CardiovascRes85:330-338；Schlossareketal.,2011,JMolCellCardiol50:613-20)。

HCM是一种常染色体的显性疾病，已知由至少10种编码心脏肌节组分的基因的多于1000种不同的突变引起，其中该至少10种编码心脏肌节组分的基因编码诸如，心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)、β-肌球蛋白重链(MYH7)、心肌肌钙蛋白T(TNNT2)、心肌肌钙蛋白I(TNNI3)、室性肌球蛋白必需轻链1(MYL3)、室性肌球蛋白调节轻链2(MYL2)、心脏α-肌动蛋白(ACTC)、α-原肌球蛋白(TPM1)、肌联蛋白(TTN)、四加半LIM蛋白1(FHL1)(Richardetal.,2003,Circulation107:2227-2232；Schlossareketal.,2011,JMolCellCardiol50:613-20；Friedrichetal.,2012,HumMolGenet21:3237-54)。大多数突变是编码全长的突变多肽的错义突变。众所周知的例外是MYBPC3和FHL1，它们主要表现为产生C-端截短的蛋白的移码突变。

HCM中最常发生突变的基因是编码心脏肌球蛋白结合蛋白C(cMyBP-C)的MYBPC3(Bonneetal.,1995,NatureGenet11:438-440；Watkinsetal.,NEnglJMed.,2011,364:1643–56)。cMyBP-C是肌节A带的主要成分，它在肌节A带中与肌球蛋白、肌动蛋白和肌联蛋白相互作用(Schlossareketal.,2011,JMolCellCardiol50:613-20)。在人和小鼠中，仅在心脏中检测到(Fougerousseetal,1998,CircRes82:130-133)，并且cMyBP-C参与调节心肌的收缩和舒张(Pohlmannetal.,2007,CircResCircRes101,928-38；Schlossareketal.,2011,JMolCellCardiol50:613-20)。MYBPC3基因中约70％的突变会导致移码，从而产生C-端截短的蛋白(Carrieretal.,1997,CircRes80:427-434)。截短的蛋白是不稳定的，而且从来没有在患者的心肌组织中检测到(Marstonetal.,2009,CircRes105:219-222；vanDijketal.,2009,Circulation119:1473-1483；vanDijketal.,2012,CircHeartFail5:36-46)。