[发明专利]用于查明确定疾病的指示物的方法

说明书

本发明涉及用于查明确定疾病的指示物(疾病指示物)的方法，在所述疾病中错误折叠蛋白质的聚集体发挥着作用，以及涉及用于选择性地定量和/或表征这些疾病指示物的方法。

由内生蛋白质形成的病理学聚集体，例如寡聚体或纤丝，出现于许多神经退行性疾病中。

淀粉样变性是一种以不溶的、错误折叠的蛋白质的细胞外沉积物为特征的疾病。这些聚集体通常以纤维，所谓β-纤丝存在。术语淀粉样的从经刚果红染色的纤丝和淀粉的分光光度共同性派生出。淀粉样变性的病因学既可以是遗传的，也可以是自发的。几种淀粉样变性也以继发性疾病出现。

在阿尔茨海默病(AD，阿尔茨海默病，拉丁语的＝MorbusAlzheimer)的情况下，出现Aβ-聚集体。除了帕金森病(MorbusParkinson)外，AD属于临床状态异质组，其共同标准在许多情况下(但不排除)是各自特异蛋白质(大多数以富于β-折叠的构象)为细胞外的全身或局部沉积。

然而，β-淀粉样蛋白-肽沉积物(或肽纤丝)仅代表过程的最后阶段。AD的病理学主特征为由Aβ-肽组成的老年斑或淀粉样斑的形成，和此外由Tau-蛋白形成的神经纤丝沉积物。Aβ-肽的前体蛋白，APP，位于神经元的细胞膜。通过蛋白水解降解和后来的修饰从其产生不同长度和类型的Aβ片段，例如Aβ1-40、Aβ1-42或pGluAβ3-42。单体Aβ-肽在整个生命期中也在健康机体中出现。

根据源于1990年代的淀粉样蛋白级联假设，以斑的形式的Aβ-沉积物是疾病症状的起因，然而，近年来不同的研究显示，特别是小的、自由扩散的Aβ-寡聚体在所有Aβ-种类中拥有最大的毒性并且对AD的出现和进展负责。因此Aβ-肽的聚集体与AD-发病机制直接相关联并且可能地作为对于AD的生物标记物使用(Wang-Dietrich等人，J.Alzheimer’sDisease34，2013，985-994)。然而，通过其他路线方法的诊断支持是有用的，特别是为了区分基于内生的错误折叠蛋白质的其他疾病。

进一步在WO2005/018424A1、WO2008/070229A2、DE102006010647A1、Bannach等人(Plosone，2012年5月，第7卷，第5期，e36620)、WO2010/003227A1、DE102011057021A1和WO2013/092952A2(27.06.2013出版的)中提到蛋白质聚集体。

AA-淀粉样变性是一种在慢性炎症性肠病，如溃疡性结肠炎(Colitisulcerosa)和克劳恩病(MorbusCrohn)情况下的很罕见的继发性疾病。在占优势地男性患者的情况下影响肾、胃肠道、脾脏、肝脏、胰脏和心脏(以下降的经常性)。AA-淀粉样变性在初次疾病显露后10至20年之内表现出来。临床症状包括肾病综合征、蛋白尿或心肌病。全身AA-淀粉样变性也影响神经细胞。对于AA-淀粉样变性的治疗，采用一系列药物，其中包括烷基化试剂、甲氨蝶呤、TNF-α-阻滞剂等。在终末肾衰竭的情况下，也可以进行透析或肾移植。但是治疗的主目标是抑制血清-淀粉样蛋白A前体蛋白的合成。

AL-淀粉样变性可以全身地或局部受限地表现出来。作为原因，显示出克隆浆细胞疾病。在这种情况下，产生生成淀粉样蛋白的轻链，其形成纤丝并沉积在各种不同器官的间质中。最经常影响肾、心脏、肠、肝脏和自主神经系统。多发性神经病的出现也是典型的。

AApoAI是高密度脂蛋白(HDL)的蛋白质组分，其天然功能是运输血液中的水不溶胆固醇和磷脂。N-末端区域中的突变给予AApoAI生成淀粉样蛋白的特性。遗传性AApoAI-淀粉样变性在足和手的多发性神经病中表现出来。以下降的经常性也影响肾、心脏、肝脏(增高的AP和γ-GT)、周围神经系统、皮肤、喉和睾丸。

AApoAII是高密度脂蛋白(HDL)的蛋白质组分，其天然功能是运输血液中的水不溶胆固醇和磷脂。ApoAII基因的终止密码子的突变给予AApoAII生成淀粉样蛋白的特性。遗传性AApoAII-淀粉样变性占优势地在肾和心脏中表现出来。