[发明专利]EGFR抗体缀合物

说明书

将美登素类通过不可切割的接头与作为完全EGFR拮抗物的EGFR抗体，诸如西妥昔单抗或帕尼单抗共价连接。结果获得具有在癌细胞中增强但在正常细胞中不增强的细胞毒性的抗癌剂。在作为部分拮抗物的EGFR抗体中或未被溶酶体加工的毒素中没有观察到这种益处。

发明领域

本发明涉及一种免疫缀合物，其靶向表达EGFR的癌细胞群体并包括与微管损伤剂诸如美登素类(maytansinoid)缀合的抗EGFR抗体，诸如帕尼单抗(panitumumab)或西妥昔单抗(cetuximab)。

发明背景

细胞结合蛋白(诸如抗体)与有效的细胞杀伤剂的缀合增强它们的抗癌活性，并提供所谓的“魔术子弹(magic bullets)”，具有混合的临床结果。

相对于裸露抗体，免疫缀合物通常显示增强的细胞杀伤功效，这增加它们抗击表达抗体靶向抗原的癌细胞的活性。但是，在表达相同抗原的正常细胞中也观察到功效的相同增加。特别关注的是增加的抗快速增殖组织(诸如皮肤)的细胞毒性。例如，由美登素类和CD44v6抗体组成的CD44v6靶向免疫缀合物非常活跃的抗击癌细胞，但因为严重的皮肤毒性(诸如毒性表皮坏死溶解，其作为增强免疫缀合物抗击也表达CD44v6的皮肤细胞的活性的结果而发生(Tijinket al.,Clin Cancer Res,2006,12:6064))而被中止。

另一种细胞表面蛋白，表皮生长因子受体或EGFR，是开发抗癌免疫缀合物的有吸引力的靶标，因为许多肿瘤表达该抗原及其快速的内化。但是，因为皮肤组织也表达EGFR，EGFR靶向药剂，诸如抗体西妥昔单抗和帕尼单抗，也显示皮肤毒性水平，这或者要求剂量降低或者在一些情况下是如此严重导致治疗的中止。

通过免疫缀合物，这些抗体的毒性利用缀合有效的细胞毒素得到扩大。这加剧了对正常细胞已经具有固有毒性的抗体的问题。例如，当通过CD44v6抗体递送时，与毒性美登素类的缀合造成严重的针对皮肤细胞的毒性。因此由于对这类免疫缀合物增强的皮肤毒性的顾虑，还没有进行基于批准的抗EGFR抗体的抗EGFR免疫缀合物的开发。正在使用其他策略来开发抗EGFR免疫缀合物。

现在正在设计抗EGFR免疫缀合物来专门解决这些安全性顾虑。这些缀合物基于针对EGFR的突变但天然存在的形式(称为EGFRvIII)或EGFR的构象形式的抗体，这两种都在肿瘤细胞而非皮肤细胞上占优势(分别见US7628986和US 7589180)。例如，抗EGFR抗体MAb806是靶向只在癌细胞上发现的EGFR表位的抗体，有可能提供超过现有EGFR抗体的优点，这些现有EGFR抗体对正常器官诸如人的皮肤都显示显著的结合。关于这种特异性，应该意识到“与现有EGFR抗体相比MAb 806最重要的优点是MAb 806可以直接缀合到细胞毒性剂”，该方法不适用于其他EGFR抗体，因为“细胞毒性缀合几乎是必然诱导严重的毒性”(US7589180)。包括与抗微管负载连接的EGFR MAb 806的免疫缀合物目前正处于晚期实体瘤患者的临床I期试验中。

还在尝试筛选裸露抗EGFR抗体及其免疫缀合物，以鉴定具有抗EGFR的部分拮抗活性和降低的抗角质形成细胞活性的那些抗体(参见US2012/0156217)，基于“掩蔽”的抗EGFR抗体(其优先在肿瘤微环境中活化)的免疫偶联物(WO 2009/025846)，和基于中等亲和力的抗体(其优先在肿瘤而非正常组织中积聚)的免疫缀合物(WO 2012/100346)。所有这些策略的目的在于降低针对皮肤和表达EGFR的其他器官的毒性，因为目前批准的抗EGFR抗体被认为不适合开发成免疫缀合物。

本发明的目的是提供一种用于治疗EGFR+疾病细胞包括EGFR+癌细胞和包括它们的肿瘤的免疫缀合物。本发明的另一个目的是提供一种选择性增强EGFR抗体针对疾病细胞的细胞毒性的方法。通过这种方法，基本上避免了针对正常细胞的毒性的增强。

发明概述