[发明专利]用于在原核细胞中重组生产多肽的方法在审
申请号: | 201480038515.9 | 申请日: | 2014-07-29 |
公开(公告)号: | CN105358705A | 公开(公告)日: | 2016-02-24 |
发明(设计)人: | C·尚茨 | 申请(专利权)人: | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 张莉;黄革生 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 原核细胞 重组 生产 多肽 方法 | ||
1.一种用于在大肠杆菌中重组生产多肽的方法,其包括以下步骤:
-培养表达多肽的NADH脱氢酶II缺陷的大肠杆菌,和
-从细胞或培养基中回收多肽,
其中,该多肽不是呼吸链途径酶或由抗生素抗性诱导基因编码的多肽。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,NADH脱氢酶Ⅱ缺陷的大肠杆菌,与除具有功能性NADH脱氢酶Ⅱ外相同基因型的大肠杆菌相比,具有相当的摄氧率。
3.根据权利要求1或2任一项所述的方法,其特征在于,NADH脱氢酶Ⅱ缺陷的大肠杆菌,与除具有功能性NADH脱氢酶Ⅱ外相同基因型的大肠杆菌相比,具有相当的生长率。
4.根据权利要求1至3任一项所述的方法,其特征在于,NADH脱氢酶Ⅱ缺陷的大肠杆菌,与除具有功能性NADH脱氢酶Ⅱ外相同基因型的大肠杆菌相比,具有更高的生产率。
5.根据权利要求1至4任一项所述的方法,其特征在于NADH脱氢酶Ⅱ缺陷的大肠杆菌是大肠杆菌K12。
6.根据权利要求1至5任一项所述的方法,其特征在于NADH脱氢酶II缺陷的大肠杆菌具有基因型thi-1、Δndh、ΔpyrF。
7.根据权利要求1至6任一项所述的方法,其特征在于NADH脱氢酶II缺陷的大肠杆菌进一步地是bd型氧化酶缺陷的。
8.大肠杆菌K12,其具有基因型thi-1、Δndh、ΔpyrF。
9.NADH脱氢酶II缺陷的大肠杆菌在生产重组多肽中的用途,其中,多肽不是呼吸链途径酶或由抗生素抗性诱导基因编码的多肽。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于NADH脱氢酶II缺陷的大肠杆菌具有基因型thi-1、Δndh、ΔpyrF。
11.根据权利要求9至10任一项所述的用途,其特征在于NADH脱氢酶II缺陷的大肠杆菌进一步地是bd型氧化酶缺陷的。
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