[发明专利]珠型软骨细胞治疗剂的制造方法有效
| 申请号： | 201480041291.7 | 申请日： | 2014-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN105392490B | 公开（公告）日： | 2020-03-03 |
| 发明（设计）人： | 李定宣;李珍妍;蔡炳哲;孙英淑;张松善 | 申请（专利权）人： | 生物解决方案有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;A61K35/32;A61K35/545;A61K35/28;A61P19/00 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 郑天松 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 软骨 细胞 治疗 制造 方法 | ||
1.珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其包括：
(a)将软骨细胞和/或具有软骨分化能力的细胞以0.5×105个～2.0×105个细胞/400～600μL/孔分注于具有V字形底壁和500μL以上的孔容量的96-孔深孔板(deep well plate)的阶段；
(b)离心所述板的阶段；
(c)将所述板在温育器中进行3维培养的阶段；及
(d)从各自的孔回收颗粒的阶段。
2.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(a)阶段，所述具有软骨分化能力的细胞选自：间叶干细胞，胚芽干细胞及诱导多能干细胞。
3.权利要求2的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中所述间叶干细胞是脂肪来源，骨髓来源，脐带来源，脐带血来源，胎盘来源，滑液膜来源，骨膜来源或软骨膜来源细胞。
4.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(a)阶段，将细胞以0.5×105个～2.0×105个/400μL/孔分注。
5.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(a)阶段利用选自多-通道移液器(multi-channel pipette)，多-移液器，微板洗涤器(washer)及微板分注器(dispenser)的装备分注细胞。
6.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(b)阶段，以500～3000rpm离心5分钟～10分钟。
7.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(c)阶段，在无血清培养基中进行3维培养。
8.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(c)阶段，进行3天～30天的3维培养。
9.权利要求1的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中在(c)阶段，还包括更换培养基的阶段。
10.权利要求9的珠型软骨细胞治疗剂的制造方法，其中利用选自多-通道移液器(multi-channel pipette)，多-移液器，微板洗涤器(washer)及微板分注器(dispenser)的装备更换培养基。
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