[发明专利]减毒流感疫苗和其用途

权利要求书

1.一种经修饰的甲型流感病毒，其包含PB1聚合酶，其中所述PB1聚合酶由发生下述取代的SEQ ID NO：2组成：对应于SEQ ID NO：2的氨基酸319的氨基酸处的亮氨酸至谷氨酰胺的取代(L319Q)。

2.一种经修饰的甲型流感病毒，其包含PB1聚合酶，其中所述PB1聚合酶由发生下述取代的SEQ ID NO：2组成：对应于SEQ ID NO：2的氨基酸319的氨基酸处的亮氨酸至谷氨酰胺的取代(L319Q)、对应于氨基酸391的氨基酸处的赖氨酸至谷氨酸的取代(K391E)、对应于氨基酸581的氨基酸处的谷氨酸至甘氨酸的取代(E581G)和对应于氨基酸661的氨基酸处的丙氨酸至苏氨酸的取代(A661T)。

3.如权利要求1或2所述的病毒，其中所述病毒的PB2聚合酶由发生下述取代的SEQ IDNO：7组成：对应于SEQ ID NO：7的氨基酸265的氨基酸处的天冬酰胺至丝氨酸的取代(N265S)。

4.如权利要求1或2所述的病毒，其中所述甲型流感病毒是选自H2N2病毒、H3N2病毒、H1N1病毒、H9N2病毒和H5N1病毒。

5.如权利要求1或2所述的病毒，其中所述甲型流感病毒是A/Ann Arbor/6/60。

6.如权利要求1或2所述的病毒，其中所述病毒是与包含在对应于SEQ ID NO：2的氨基酸310至325的氨基酸中缺乏一个或多个突变的PB1聚合酶的甲型流感病毒相比从37℃至39℃的生长减缓的活减毒甲型流感病毒。

7.一种免疫原性组合物，其包含如权利要求1至6中任一项所述的病毒和药学上可接受的载体。

8.权利要求7所述的免疫原性组合物在制备用于在受试者中引发针对流感病毒的免疫反应的药物中的用途。

9.权利要求7所述的免疫原性组合物在制备用于治疗或预防受试者的流感感染的药物中的用途。

10.一种编码甲型流感病毒的PB1聚合酶的重组核酸，其中所述PB1聚合酶由发生下述取代的SEQ ID NO：2组成：对应于SEQ ID NO：2的氨基酸319的氨基酸处的亮氨酸至谷氨酰胺的取代(L319Q)。

11.一种编码甲型流感病毒的PB1聚合酶的重组核酸，其中所述PB1聚合酶由发生下述取代的SEQ ID NO：2组成：对应于SEQ ID NO：2的氨基酸319的氨基酸处的亮氨酸至谷氨酰胺的取代(L319Q)、对应于氨基酸391的氨基酸处的赖氨酸至谷氨酸的取代(K391E)、对应于氨基酸581的氨基酸处的谷氨酸至甘氨酸的取代(E581G)和对应于氨基酸661的氨基酸处的丙氨酸至苏氨酸的取代(A661T)。

12.一种载体，其包含如权利要求10或11所述的核酸。

13.一种产生如权利要求1所述的流感病毒的方法，其包括：

a)用一个或多个包含以下各项的载体转染宿主细胞群体：

i)编码甲型流感病毒的内部基因组节段的核酸序列；和

ii)编码PB1聚合酶的核酸，其中所述PB1聚合酶由发生下述取代的SEQ ID NO：2组成：对应于SEQ ID NO：2的氨基酸319的氨基酸处的亮氨酸至谷氨酰胺的取代(L319Q)；

b)培养所述宿主细胞；和

c)回收经修饰的甲型流感病毒。