[发明专利]用于使用表达肿瘤抗原的痘病毒和免疫检查点抑制剂的拮抗剂和/或激动剂治疗癌症的组合疗法

说明书

发明领域

本发明涉及使用编码肿瘤抗原的重组痘病毒治疗癌症。更具体地，本发明涉及使用编码肿瘤抗原的一种或多种重组痘病毒与免疫检查点抑制剂的一种或多种激动剂和/或拮抗剂的组合治疗癌症。

发明背景

重组痘病毒已用作用于传染性生物体并最近用于肿瘤的疫苗。Mastrangelo等JClinInvest.2000；105(8):1031–1034。所述痘病毒组中的两种即禽痘病毒和正痘病毒已显示出在对抗肿瘤方面的有效性并且已涉及潜在的癌症治疗。

一个示例性禽痘病毒种类鸡痘已显示为用于人施用的安全媒介物，因为鸡痘病毒进入哺乳动物细胞并表达蛋白质，但是复制失败。Skinner等ExpertRevVaccines.2005年2月；4(1):63-76。另外，鸡痘病毒作为媒介物用于表达的用途正在于针对癌症、疟疾、肺结核和AIDS的疫苗的众多临床试验中加以评估。同前。

已显示正痘病毒为用于将抗原施用给患者以诱导针对抗原的免疫应答的有用载体。最为熟知的正痘病毒牛痘被用于天花的全球根除中并且显示了作为载体和/或疫苗的有用性。重组牛痘载体被工程化改造以表达多种插入基因，所述基因包括若干种肿瘤相关基因诸如p97、HER-2/neu、p53和ETA(Paoletti等,1993)。

另一已知正痘病毒为经修饰的安卡拉牛痘(MVA)病毒。MVA与痘病毒科家族中的正痘病毒属的成员牛痘病毒有关。MVA通过牛痘病毒的安卡拉毒株(CVA)在鸡胚胎成纤维细胞上连续516次传代来产生(相关综述，参见Mayr,A.等Infection3,6-14(1975))。由于所述的长期传代，所得MVA病毒的基因组缺失了其基因组序列的约31千碱基并因此被描述为对于禽细胞的复制宿主细胞高度受限(Meyer,H.等,J.Gen.Virol.72,1031-1038(1991))。已表明在多种动物模型中所得MVA是明显无毒性的(Mayr,A.和Danner,K.,Dev.Biol.Stand.41:225-34(1978))。另外，所述MVA毒株已经在临床试验中作为针对人天花病免疫的疫苗进行了测试(Mayr等,Zbl.Bakt.Hyg.I,Abt.Org.B167,375-390(1987)；Stickl等,Dtsch.med.Wschr.99,2386-2392(1974))。在这些人研究中，与基于牛痘的疫苗相比，MVA具有减小的毒性或感染性，同时MVA仍诱导良好的特异性免疫应答。

在接下来的数十年中，MVA被工程化改造用作用于重组基因表达的病毒载体或用作重组疫苗(Sutter,G.等,Vaccine12:1032-40(1994))。

尽管在二十世纪七十年代期间Mayr等已证明MVA在人和哺乳动物中是高度减毒和无毒性的，但是某些研究者已报道MVA在哺乳动物和人细胞系中并未完全减毒，因为在这些细胞中可能发生残余的复制。(Blanchard等,JGenVirol79,1159-1167(1998)；Carroll和Moss,Virology238,198-211(1997)；Altenberger,美国专利号5,185,146；Ambrosini等,JNeurosciRes55(5),569(1999))。假定这些出版物中所报道的结果是用MVA的不同的已知毒株获得的，因为所用的病毒在它们的特性、尤其在它们在各种细胞系中的生长行为方面有本质上的差异。出于各种原因(包括与在人中使用有关的安全考虑)，所述残余的复制是不希望的。

已描述了具有用于开发更安全产品(诸如疫苗或药物)的增强的安全特性的MVA的毒株。参见，美国专利号6,761,893和6,193,752。所述毒株能够在非人细胞和细胞系中，特别是在鸡胚胎成纤维细胞(CEF)中进行繁殖性复制，但是不能在某些已知允许已知牛痘毒株复制的人细胞系中进行明显的繁殖性复制。所述细胞系包括人角化细胞细胞系HaCat(Boukamp等JCellBiol106(3):761-71(1988))、人宫颈腺癌细胞系HeLa(ATCC号CCL-2)、人胚胎肾细胞系293(ECACC号85120602)、和人骨骼骨肉瘤细胞系143B(ECACC号91112502)。所述毒株还不能够在体内例如在某些小鼠品系(诸如免疫功能严重受损并且对复制病毒非常敏感的转基因小鼠模型AGR129)中进行明显的繁殖性复制。参见，美国专利号6,761,893。已描述了一种所述MVA毒株以及其衍生物和重组体(称之为“MVA-BN”)。参见，美国专利号6,761,893和6,193,752，所述专利在此以引用方式并入。