[发明专利]酸性α-葡糖苷酶中反义诱导的外显子2纳入

权利要求书

1.10-40个核苷酸或核苷酸类似物的反义寡聚体化合物，所述化合物包含：

非天然化学主链，其选自氨基磷酸酯或磷二酰胺吗啉代寡聚体(PMO)、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、硫代磷酸酯寡聚体、三环-DNA寡聚体、三环-硫代磷酸酯寡聚体、2’O-Me-硫代磷酸酯寡聚体，或前述的任意组合；和

与人酸性α-葡糖苷酶(GAA)基因的前体mRNA的内含子1(SEQ ID NO:1)、内含子2(SEQID NO:2)、或外显子2(SEQ ID NO:3)内的区互补的靶向序列，其中，所述靶向序列选自SEQID NO:4-6、9、11、13、16、24、25、45、50、54、59-61、68、72、73、77、82、83、84、85、89和91，X选自尿嘧啶(U)或胸腺嘧啶(T)。

2.一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

各Nu是核碱基，一起形成靶向序列；

x是8-38的整数；

各Y独立地选自O或–NR^a，其中R^a选自氢、-T¹-NR^cR^dR^e和–[(C(O)CHR'NH)_m]R”，其中：

R^c选自氢、C₁-C₆烷基、芳烷基和-C(＝NH)NH₂，

R^d选自氢、芳烷基和C₁-C₆烷基，或者

当R^C和R^d各自独立地是C₁-C₆烷基或芳烷基时，R^c和R^d与其附连的氮原子一起形成5-7元环，其中所述环任选地被选自C₁-C₆烷基、苯基、卤素和芳烷基的取代基取代，并且

R^e选自电子对、氢、C₁-C₆烷基和芳烷基；

各L独立地选自

和–[(C(O)CHR'NH)_m]R”，其中w是3-20的整数，并且S是1-8的整数；

n是0-3的整数；

各R¹独立地选自-N(CH₃)₂、-NR⁵R⁶、-OR⁷、

式(II)的部分：

其中：

R⁸选自氢、甲基、-C(＝NH)NH₂、-Z-T²-NHC(＝NH)NH₂和–[(C(O)CHR'NH)_m]R”，其中Z是羰基或直接键，

R⁹选自电子对、氢、C₁-C₆烷基和芳烷基；

各R¹⁰独立地选自氢或甲基；和

式(III)的部分：

其中：

q是0-2的整数，

R¹¹选自氢、C₁-C₆烷基、芳烷基和-C(＝NH)NH₂，

R¹²选自氢、芳烷基和C₁-C₆烷基，或者

R¹¹和R¹²与其附连的氮原子一起形成5-7元环，其中所述环任选地被选自C₁-C₆烷基、苯基、卤素和芳烷基的取代基取代，并且

R¹³选自电子对、氢、C₁-C₆烷基和芳烷基；

R²选自氢、OH、核苷酸、-(CH₂)_mC(O)NR^fR^g，其中R^f和R^g独立地选自H、酰基、C₁-C₆烷基和–[(C(O)CHR’NH)_m]R”、H(O(CH₂)_sO)_w-、H(OCH₂CH₂O)_w-、三苯甲基、-C(＝O)OR^f和酰基，其中R^f是C₁-C₃₀烷基，其包含一个或多个氧或羟基部分或其组合，或R²不存在；

R³选自氢、C₁-C₆烷基、核苷酸、–[(C(O)CHR'NH)_m]R”、-C(＝NH)NH₂、三苯甲基、-C(＝O)OR^g、酰基、-C(O)(CH₂)_mC(O)和T⁴-(4-(4,6-(NR₂)-1,3,5-三嗪-2-基)哌嗪-1-基，，其中R^g是包含一个或多个氧或羟基部分或其组合的C₁-C₃₀烷基，

T⁴选自–C(O)(CH₂)₆C(O)-或–C(O)(CH₂)₂S₂(CH₂)₂C(O)-，且R是–(CH₂)OC(O)NH(CH₂)₆NHC(NH)NH₂；

R⁴选自电子对、氢、C₁-C₆烷基和酰基；

R⁵独立地选自氢或甲基；

R⁶和R⁷独立地选自氢或–T³-NR^cR^dR^e；并且

各T¹、T²、和T³独立地是长度至多为18个原子的任选接头，包括烷基、烷氧基或烷氨基，或其组合，

其中，在-[(C(O)CHR'NH)_m]R”中：

R'是天然产生的氨基酸或其一个或两个碳的同系物的侧链，

R”选自氢或酰基，

m是1-60的整数，

其中，所述靶向序列与人酸性α-葡糖苷酶(GAA)基因的前体mRNA的内含子1(SEQ IDNO:1)、内含子2(SEQ ID NO:2)或外显子2(SEQ ID NO:3)内的区互补，其中，所述靶向序列选自SEQ ID NO:4-6、9、11、13、16、24、25、45、50、54、59-61、68、72、73、77、82、83、84、85、89和91，X选自尿嘧啶(U)或胸腺嘧啶(T)。