[发明专利]一种具有肿瘤主动靶向及pH敏感性细胞穿膜能力的新型多肽

说明书

本发明提供了一种既能主动靶向肿瘤细胞高表达的整合素受体，同时又能高效介导入胞的新型多肽。所述的新型多肽TR（c(RGDfK)‑AGYLLGHINLHHLAHL(Aib)HHIL‑Cys）是由特异性靶向整合素受体的环状RGD肽（c(RGDfK)）和非特异性的pH敏感性细胞穿膜肽TH(AGYLLGHINLHHLAHL(Aib)HHIL‑Cys)通过共价键连接而成。将该新型多肽TR修饰于载药系统表面，其能介导载药系统更加高效地传递到肿瘤内部，从而更加有效地治疗肿瘤。

技术领域

本发明涉及药物制剂技术领域。具体地说，本发明涉及一种既有主动靶向肿瘤细胞高表达的整合素受体的能力又具有pH敏感性细胞穿膜能力的新型多肽。该新型多肽经修饰于载药系统表面用于介导载药系统高效主动靶向高表达整合素受体的肿瘤及高效介导其入胞，达到提高肿瘤治疗效果的目的。

背景技术

1. 癌症的发病率和死亡率近年来呈逐年上升的趋势，已经严重威胁了人类健康。尽管有多种治疗癌症的手段，但目前最为常用的仍然是化疗。由于化疗药物往往在正常组织和肿瘤组织间缺乏选择性，因此其治疗效果和应用范围常受到限制。目前，纳米载药系统的发展给靶向肿瘤治疗带来新的突破。

2. 相对于普通的载药系统，特异性配体修饰的载药系统增加了其在肿瘤部位的蓄积，同时降低了在非靶向性器官中的蓄积（如肝，脾等）。其中,整合素（integrin）是一类细胞黏附受体分子，在所有的有核细胞表面均广泛表达，其在体内能够介导细胞与细胞之间，以及细胞与细胞外基质的互相黏附。整合素是由α和β亚基通过非共价键结合形成的异二聚体，在脊椎动物体内，整合素有18种α亚基和8种β亚基，其可以组成约24种不同的异二聚体结构。其中整合素α_vβ₃在神经胶质瘤、黑色素瘤、卵巢癌等多种肿瘤细胞及肿瘤相关的内皮细胞表面高度表达，与肿瘤的血管发生、肿瘤转移及肿瘤的抗放射治疗密切相关。因此，整合素α_vβ₃常被用作肿瘤靶向的特异性靶点。已有研究证实，精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）的三肽序列能够特异性识别含α_v亚基的整合素家族。进一步的研究也已证实，具有环状结构的RGD能够高度地与整合素α_vβ₃、α_vβ₅结合。然而，特异性配体（如RGD、Tf等）虽能主动靶向高表达相关受体的肿瘤细胞，但受制于优于受体的饱和效应不能高效地介导载药系统进入肿瘤细胞。

3. 另一方面，细胞穿膜肽（cell-penetrating peptides, CPPs)是一类具有很强的穿透细胞膜能力的短肽。穿膜肽在生理条件下带有正电荷，它既可以从生物体内提取，也可以通过人工合成。目前，细胞穿膜肽已经成功地应用于蛋白、多肽、核苷酸及小分子物质的递释，这类载药系统的优势在于穿膜效率高。但因为其本身具有下述两个特征而不能广泛地被使用：①细胞穿膜肽带正电荷的特性使得其在血液循环过程中容易与调理蛋白结合从而使所介导的载药系统快速地被网状内皮系统清除；②细胞穿膜肽在正常的组织以及肿瘤之间不具有选择性。

4. 相对于正常的细胞，肿瘤细胞是一种快速增长的细胞，在生长过程中需要消耗大量的氧气和营养，产生过剩的乳酸，导致肿瘤部位的pH偏酸。另外，正常组织中的微血管内皮间隙致密、结构完整，载药系统不易透过血管壁，而实体瘤组织中血管丰富、血管壁间隙较宽、结构完整性差，淋巴回流缺失，造成载药系统具有选择性高通透性和滞留性，这种现象被称作实体瘤组织的高通透性和滞留效应，简称EPR效应。