[发明专利]一种灰树花多糖的提纯方法有效
申请号: | 201510003250.5 | 申请日: | 2015-08-04 |
公开(公告)号: | CN104497161A | 公开(公告)日: | 2015-07-29 |
发明(设计)人: | 韩伟;满宁;罗文锋;韩乐;马迪;豆欣欣;汪佳丹 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 胡红芳 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 灰树花 多糖 提纯 方法 | ||
1.一种灰树花多糖的提纯方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将灰树花粉碎,选用粒径为20目的灰树花,在pH为6的去离子水中进行微波提取,得到灰树花多糖提取液;
(2)将树脂用去离子水反复浸洗,然后用NaOH溶液浸泡18~24h,再用盐酸溶液浸泡18~24h,最后用去离子水浸洗,待用;
(3)将步骤(2)处理过的树脂进行湿法装柱,形成树脂床层后,静置过夜备用;使用前用去离子水过柱,将树脂柱活化;
(4)将步骤(1)得到的灰树花多糖提取液取适量装入步骤(3)的活化树脂柱,收集流出液,即为脱蛋白纯化后灰树花多糖提纯液。
2.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,步骤(1)中微波提取的装置的输出功率为500~650W,频率为2450MHz,辐射过程中鼓泡搅拌;液固比为20~40mL/1g,提取时间为60~270s。
3.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,步骤(2)所述树脂是氨基酸分离专用树脂HD-8阳离子交换树脂。
4.根据权利要求1或3所述的提纯方法,其特征在于,步骤(2)中将树脂用去离子水反复浸洗的方法如下:浸洗时每隔5~10分钟换一次水,并不时搅动,换水4~5次后,再每隔15~20分钟换水一次,浸洗至浸洗水不褐色为止。
5.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,步骤(2)中所述NaOH溶液的浓度是0.5~1mol/L,其溶液体积是树脂体积的3~5倍,浸泡树脂的前两个小时内不断搅动,用水冲洗,直至浸泡水pH值为6~7。
6.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,步骤(2)中所述盐酸溶液的浓度是0.5~1mol/L,其溶液体积是树脂体积的3~5倍,将树脂转成H+型,盐酸浸泡后,用去离子水浸洗,至pH值为6以上时,即可进行装柱。
7.根据权利要求3所述的提纯方法,其特征在于,称取20g预处理过的HD-8阳离子交换树脂湿法上柱,将去离子水注入层析柱内,赶走空气;再将经过步骤(2)处理的HD-8阳离子交换树脂加入去离子水混合至适宜稠度,灌注入层析柱内,使其自由沉降;沉降结束形成树脂床层后,静置过夜备用。
8.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,步骤(4)中将80~100mL去离子水以0.5~2.5mL/min的流速流过树脂柱,重复操作3遍,即可上样。
9.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,步骤(4)中所述灰树花多糖提取液中蛋白质的浓度为0.15~0.5mg/mL。
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