[发明专利]一种快速定量检测肌钙蛋白I的均相荧光免疫试剂组及其制备方法

权利要求书

1.一种快速定量检测肌钙蛋白I的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，包括稀土元素螯合物标记的抗肌钙蛋白I单克隆抗体、近红外荧光化合物标记的抗肌钙蛋白I单克隆抗体和系列浓度的肌钙蛋白I校准品。

2.根据权利要求1所述的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，稀土元素螯合物为Eu³⁺螯合物。

3.根据权利要求2所述的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，稀土元素螯合物为BHHCT-Eu³⁺或BHHBCB-Eu³⁺。

4.根据权利要求1所述的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，所述近红外荧光化合物为Alexa系列近红外荧光化合物、DyLight系列近红外荧光化合物和CF系列近红外荧光化合物中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，所述近红外荧光化合物Alexa647、DyLight-DY647和CF647中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，所述系列浓度的肌钙蛋白I校准品由校准品稀释液稀释肌钙蛋白I配制而成，所述校准品稀释液为含0.01-0.5wt％PEG1000、1-5wt％BSA、00.01-0.05wt％表面活性剂的磷酸盐缓冲液。

7.一种权利要求1-6中任意一项所述的均相荧光免疫试剂组的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)稀土元素螯合物标记的抗肌钙蛋白I单克隆抗体的制备：

取0.5-5mg/ml的抗肌钙蛋白I单克隆抗体溶液，加入0.05-0.5mol/L的NaHCO₃溶液后，调pH至8.5-10，滴加10-100μg/ml配体化合物溶液，搅拌反应0.6-2h，分离得到配体化合物标记的抗肌钙蛋白I单克隆抗体，加入终浓度为0.05-0.5wt％的BSA和0.01-1wt％的NaN₃，调pH至5.5-6.5，免疫分析前，加入Eu³⁺溶液，使配体化合物与Eu³⁺等摩尔浓度，即得，其中，抗肌钙蛋白I单克隆抗体溶液、NaHCO₃溶液和配体化合物溶液的体积比为0.1-1∶1∶0.01-0.05；

2)近红外荧光化合物标记的抗肌钙蛋白I单克隆抗体的制备：

将抗肌钙蛋白I单克隆抗体用0.05-0.5mol/L的NaHCO₃溶液稀释至0.5-5mg/ml，加入近红外荧光化合物溶解液，搅匀，室温孵育0.5-2h，分离得到近红外荧光化合物标记的抗肌钙蛋白I单克隆抗体；

3)系列浓度的肌钙蛋白I校准品的制备：

将肌钙蛋白I用校准品稀释液稀释配制成系列浓度，即得，

其中，1)、2)和3)的顺序可以任意颠倒。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，抗肌钙蛋白I单克隆抗体在于配体化合物反应之前，先进行透析处理。