[发明专利]25-羟基维生素D定量检测试纸条及其应用

权利要求书

1.一种用于25-羟基维生素D定量检测的试纸条，包括样本垫、结合垫、NC膜、吸水垫及PCV衬板；所述样本垫、结合垫、NC膜和吸水垫按样品层析方向依次设置于PCV衬板上；

其特征在于：所述样本垫采用具有网状结构且可以捕获粒径为2.0-2.6μm之间的颗粒物的纤维垫，且包被有25-羟基维生素D活化的乳胶微粒和/或1，25-二羟基维生素D活化的乳胶微粒；

所述结合垫上涂布有胶体金标记的抗25-羟基维生素D单克隆抗体和胶体金标记的抗人维生素D结合蛋白单克隆抗体；

所述NC膜上包括检测线和质控线，所述检测线靠近所述结合垫，包被有25-羟基维生素D-牛血清白蛋白偶联物和重组人维生素D结合蛋白，所述质控线靠近吸水垫，包被有羊抗鼠抗体。

2.根据权利要求1所述的试纸条，所述样本垫上25-羟基维生素D活化的乳胶微粒和/或1，25-二羟基维生素D活化的乳胶微粒的包被浓度为0.5-10μg/cm²。

3.根据权利要求1所述的试纸条，所述结合垫上胶体金标记的抗25-羟基维生素D单克隆抗体的浓度为0-10μl/cm²；所述胶体金标记的抗人维生素D结合蛋白单克隆抗体的浓度为0-10μl/cm²。

4.根据权利要求1所述的试纸条，所述NC膜的检测线上25-羟基维生素D-牛血清白蛋白偶联物的包被浓度为1.0-2.0μg/条，所述重组人维生素D结合蛋白的包被浓度为0-2.0μg/条；所述质控线上羊抗鼠抗体的包被浓度为0.5-2.0μg/条。

5.根据权利要求1所述的试纸条，所述重组人维生素D结合蛋白为具有人维生素D结合蛋白第159-458位氨基酸序列的多肽。

6.根据权利要求1所述的试纸条，所述样本垫上25-羟基维生素D活化的乳胶微粒和/或1，25-二羟基维生素D活化的乳胶微粒的包被浓度为2.0μg/cm²；所述结合垫上胶体金标记的抗25-羟基维生素D单克隆抗体的浓度为10μl/cm²，所述胶体金标记的抗人维生素D结合蛋白单克隆抗体的浓度为10μl/cm²；所述NC膜的检测线上25-羟基维生素D-牛血清白蛋白偶联物的包被浓度为1.0μg/条，所述重组人维生素D结合蛋白的包被浓度为1.0μg/条；所述质控线上羊抗鼠抗体的包被浓度为0.8μg/条。

7.一种用于25-羟基维生素D定量检测的方法，其特征在于：采用权利要求1-6任一所述的试纸条检测样品中25-羟基维生素D的总含量，其步骤如下：

(1)将待测样品滴加在样本垫上，室温反应15min；

(2)待质控线显色后，将试纸条放入读条仪，读取样品中25-OH VD的浓度。

8.一种用于25-羟基维生素D定量检测的检测卡，包含权利要求1-6任一所述的试纸条及卡盒，其特征在于：所述卡盒包括盒盖和盒底；所述试纸条设置于所述卡盒的盒底；所述卡盒的盒盖上具有加样孔和观察窗，所述加样孔正对所述试纸条上的样本垫，所述观察窗正对所述试纸条上的检测线和质控线。