[发明专利]一种霍山石斛的快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种霍山石斛的组培方法，尤其涉及一种霍山石斛的组织培养快繁方法。

背景技术

    霍山石斛为兰科多年生附生草本植物。形曲不直，似蚱蜢髀，是石斛中的极品。为我县独有，拥有原产地地理保护标志和濒临灭绝的国家级珍惜名贵中药材，是国家野生中药材二级保护品种，有“植物大熊猫”之称。《本草纲目》记载：石斛生于悬崖峭壁之间、性微寒，有养胃生津、滋阴除热、补肾益精、明目之功效。以之代茶可开胃健脾。霍山石斛具有益精填髓、补五脏内绝不足，平胃气、长肌肉、益智除烦、清虚热、轻身延年之功效。经中国科技大学和中山医科大学研究证明：霍山石斛具有增强T细胞B细胞WK细胞和巨噬细胞的作用。对抑制肿瘤和降血糖有非常好的疗效。可促进血液循环，增强心脏功能，促进胃肠蠕动增强消化功能。显著提高人体的sop（超氧岐化酶）水平。降低LPO（过氧化脂质），起到显著的抗衰老作用。药用石斛有50种之多，品质最佳的是霍山石斛，为石斛中的珍品，野生石斛与黄金等价。

石斛种子极为细小，胚胎发育不完全，缺乏胚乳组织，萌发率极低（不足5%），且自然条件下必须与兰菌共生才能萌发。因此无法在大田或苗床上播种，很难生产足够的实生苗用于栽培。霍山石斛对生长环境要求苛刻。传统人工繁殖方式如分株，扦插等，繁殖速度慢，增值率低。霍山石斛具有极高的药用价值和经济价值，长期依赖采挖野生资源来满足市场需求，目前霍山石斛野生资源极其稀少，已被列入国家重点保护药用植物。

所以现在利用组培快繁技术试管苗，不仅是解决霍山石斛野生资源紧缺的有效方法，也对该物种的种质资源保护起到积极作用。虽然近年针对霍山石斛组培快繁的组培技术得到长足的发展，但无外乎是MS基本培养基再添加一些生物激素这种常规的方法，存在诱导发芽率低，根系不发达，茎偏西，出瓶后种植存活率低等问题。本发明就是在长期实践过程中对原有配方进行改进，对快繁技术中一些元素的量尤其是N元素的量进行调整，大大提高了霍山石斛组培苗的质量，从而提高了种植存活率，保证了霍山石斛的原种性，为霍山石斛建立稳定的组培快繁体系。

发明内容

本发明的目的在于提供一种霍山石斛的快繁方法，它在基本培养基的基础上对配方进行改进，培养出质量更好，存活率更高的霍山石斛种苗。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

    一种霍山石斛的快繁方法，包括以下步骤：

    （1）采集石斛蒴果种子，不同种龄的种子萌发率不一样，种龄越长，萌发率越高，最好选择4-6月种龄的种子，必须注意要是未开裂的蒴果，种胚的颜色最好是黄色或白色；

    （2）种子消毒：剪下选好的同一成熟度铁皮石斛蒴果，先用洗衣粉液浸泡10min后用自来水反复冲洗6次，再在超净工作台的无菌条件下，将经过预处理的蒴果用75%的酒精溶液灭菌30s，然后用1%的升汞水处理8-10min，最后用无菌水反复冲洗6次，放在消毒好的无菌滤纸上吸干果实表面水分；

    （3）在无菌条件下将处理好的果荚用灭菌好的刀片切开一小口，用镊子将粉末状的种粒播于准备好的培养基A中，在无光照条件下培养30天，再放置到有光照组培室条件下培养45天，保持组培室温度在25℃；

    （4）原球茎的增值及分化培养：将萌发的种子均匀播撒在培养基B中，培养60天，直至萌发的种子全部分化成1cm的幼芽；

    （5）生根壮苗培养；采用的生根壮苗培养基为上述培养基C，将分化成幼芽的石斛幼苗一株株的接种到培养基C中，培养90至120天，幼苗会长粗变长，每株会长出3到4根根系，即成生命力强，生长健壮的石斛组培苗。