[发明专利]血清3型鸭甲型肝炎病毒活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种血清3型鸭甲型肝炎活疫苗(DHAV-3)及其制备方法，属于兽用生物制品领域。

背景技术

鸭甲型肝炎病毒(duck hepatitis A virus,DHAV)属微RNA病毒科成员(陆承平.兽医微生物学.(第五版)北京：中国农业出版社,2012,460-466.)，是引致雏鸭肝炎的最重要病原，主要感染4周龄以下的雏鸭发生以肝脏出血为特征的急性肝炎，发病急、传播快、发病率和死亡率可达90％以上。由DHAV引起的鸭肝炎自上世纪五十年代在美国被发现以后，迅速在世界养鸭地区爆发和蔓延，我国黄均建(黄均建.小鸭病毒性肝炎研究，上海农业科学院畜牧兽医研究所单行本，1963.)1963年首次报道了上海地区鸭场爆发此病，王平等(王平等.北京小鸭病毒性肝炎的研究.北京大学学报(自然科学版)，1980，1：55)1980年首先在北京地区发病鸭场分离到病毒，之后我国养鸭地区均有本病的发生和流行。随着近几年来鸭肝炎弱毒活疫苗和高免卵黄抗体的研制成功及临床应用，使本病在很大程度上得到很好的控制。

1992年Sandhu等(Sandhu,T.S.,B.W.Calnek,and L.Zeman.1992.Pathologic and serologic characterization of a variant of duck hepatitis type Ⅰ virus.Avian Dis 36:932-936.)报道鸭肝炎病毒发生变异现象，2002年苏敬良等(苏敬良等.新型鸭肝炎病毒的分离及初步鉴定.中国兽医科技,2002,1:15-16.)报道北京和广西等地区免疫过鸭肝炎疫苗或注射过鸭肝炎高免卵黄抗体的鸭群仍然发生鸭肝炎，并且证明分离到的鸭肝炎病毒与经典的鸭肝炎病毒无血清学交叉反应，故暂称新型鸭肝炎病毒。2007年，台湾学者Tseng(Tseng C.H.,Tsai H.J.,Molecular characterization of a new serotype of duck hepatitis virus.Virus Res,2007,126:19-31.)和韩国学者Kim(Kim M.C.,Kwon Y.K.,Joh S.J.,et al.Recent Korean isolates of duck hepatitis virus revealed the presence of a new geno-and serotype when compared to duck hepatitis virus type1 type strains.Arch Virol.2007,1 52:2059-2072.)分别报道分离到不同于经典的鸭肝炎病毒的新型鸭肝炎病毒，通过分子生物学和血清学鉴定，表明台湾和韩国分离的新型鸭肝炎病毒均属DHAV，但它们之间也存在着明显的血清学差异，所以现在已明确将DHAV分为3个血清型^[1]，并将经典的鸭肝炎病毒、台湾新型鸭肝炎病毒和韩国新型鸭肝炎病毒分别归属到血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)、血清2型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-2)和血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)之中。通过分子生物学鉴定和血清学试验证实，我国大陆自2002年以来分离鉴定的所有新型鸭肝炎病毒株与韩国新型鸭肝炎病毒高度同源，均为血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)。

众所周知，我国是养鸭大国，目前鸭的年饲养量已达40亿只，占全世界鸭饲养总量的70％以上，鸭肝炎一直是我国养鸭生产的头号疫病，近年来随着血清1型鸭甲型肝炎活疫苗和高免卵黄抗体的推广应用，使血清1型鸭甲型肝炎得到有效控制，但近十年来由于新出现血清3型鸭甲型肝炎在我国养鸭地区爆发和迅速蔓延，又成为制约我国养鸭生产新的严峻问题。因此，血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)弱毒株的培育和活疫苗的研制，以及针血清1型和血清3型鸭甲型肝炎二价活疫苗的研制成为当务之急。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)的弱毒株及其单价活疫苗和血清1型与血清3型二价活疫苗的制备方法。

本发明可以通过以下技术方案实现：

1.一种血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)弱毒HuB60株，该毒株已于2015年01月06日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号CGMCC No.10307。

2.如权利要求1所述血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)HuB60株是通过鸡胚传代培养获得的弱毒株。