[发明专利]一种三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法有效
申请号: | 201510008368.7 | 申请日: | 2015-01-01 |
公开(公告)号: | CN104542292B | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
发明(设计)人: | 刘慧芬 | 申请(专利权)人: | 江西瀚野农业开发有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01H1/02;A01H1/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 334100*** | 国省代码: | 江西;36 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 三清山 耐寒 铁皮 石斛 种苗 培育 方法 | ||
1.一种三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法,通过铁皮石斛杂交育种→铁皮石斛群体改良→铁皮石斛优良品系选育→铁皮石斛优良种苗的扩繁,其特征在于具体步骤如下:
I:铁皮石斛杂交育种
i.收集三清山野生铁皮石斛,同时收集霍山米斛;
ii.以三清山野生铁皮石斛粗壮植株为母本,以霍山米斛粗壮植株为父本,进行杂交,得到蒴果;
II:铁皮石斛群体改良
i.将I(i)得到的蒴果播种在植物组织细胞培养基上萌发、培养,得到铁皮石斛植株,即为基础群体;
ii.将基础群体置入人工气候箱中进行培养,调查人工气候箱的温度设置,使每天的气温变化从0℃逐步上升至30℃,其中0℃保持2小时,然后根据基础群体在人工气候箱中的整体表现和有效成分含量由高到低的顺序选出优良单株;
iii.以ii中选出的优良单株进行植物组织细胞培养扩繁,获得优良个体;
iv.选择一个以上种植区进行铁皮石斛单株优良后代的比较试验,控制植株之间合理的生长距离,从而选出优良个体,继续培养或种植,待种子成熟后混收种子,即为改良群体;
III:运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良品系选育
在步骤II得到的改良群体中选择所需要的优良个体,并利用植物组织细胞培养技术对这些个体进行扩繁获得后代,选择一个以上地区进行耐寒铁皮石斛稳定性试验,选出优良后代培育成新品系;
IV.运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良种苗的扩繁运用植物组织细胞培养技术将步骤III中所得的新品系快速繁殖,得到耐寒稳定且有效成分含量测定高的铁皮石斛优良种苗。
2.根据权利要求1所述的三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法,其特征在于具体步骤如下:
I:铁皮石斛杂交育种
i.收集三清山野生铁皮石斛30份种质,同时收集霍山米斛30份种质;
ii.以三清山野生铁皮石斛粗壮植株为母本,以霍山米斛粗壮植株为父本,进行杂交,得到蒴果,实施例中,经对所收集铁皮石斛种质进行培育,经植株间比较,选出整体表现较好、有效成分含量高的植株作为新的母本和父本进行杂交,选择整体表现较好的标准为:株高、茎秆形状和粗壮度、节间纵纹颜色、叶片颜色这类外观指标;有效成分含量的标准是:含铁皮石斛多糖即以含葡萄糖计不得少于25.0%,含甘露糖为13.0-38.0%;实施例中的杂交是指在花期采用人工授粉的形式进行;
II:铁皮石斛群体改良
i.将I(i)得到的蒴果播种在植物组织细胞培养基上萌发、培养,得到铁皮石斛植株,即为基础群体,铁皮石斛蒴果的标准为10-11月份选取外表发黄但未开裂、饱满的蒴果,操作方法为:把果实放入干净的消毒容器中,加入75%酒精浸泡消毒果实,30秒后,将酒精倒出,再加入0.1%生汞进行果实表面消毒,轻摇容器,使果实灭菌彻底,然后倒出生汞液体,再用无菌水冲洗4~5次;采用MS培养基+香蕉汁30g/L+0.5mg/L NAA+白糖30g/L+花宝3g/L为基质,培养温度30±2℃,相对湿度60~80%,每天光照8~12h,光照强度1000~2000LX;待种子萌发后,再转接至1/2MS+香蕉汁30g/L+白糖30g/L+花宝3g/L培养基上进行原球茎诱导增殖,然后转接至MS+土豆汁30g/L+白糖30g/L+花宝3g/L+NAA 0.2mg/L的培养基上进行分化成苗,最后转接至MS+0.2mg/L NAA+30g/L土豆汁的培养基上进行壮苗生根,经炼苗后即可作为大田用苗使用;
ii.将基础群体置入人工模拟气候箱中进行培养,调节温度控制,使气候箱中的温度每天从0℃上升至30℃,且0℃应保持2小时,根据基础群体在人工气候箱中的长势和有效成分含量由高到低的顺序选出优良单株50个;
iii.以ii中选出的优良单株50个的蒴果(内含种子)进行植物组织细胞培养扩繁,获得50个单株的优良后代个体,进行扩繁所用的培养基与培养条件同ii;
iv.选择玉山、德兴、婺源3个环绕三清山的种植区进行铁皮石斛单株优良后代的比较试验,根据试验结果,从50个后代系中选择出整体表现较好、有效成分含量高的优良后代20个,除去未中选的所有铁皮石斛植株,并将中选的20个优良后代分别疏去部分植株,并进行相间移植,使其获得充分受粉,种子成熟后混收种子,即为改良群体;
III:运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良品系选育
在群体改良的第四个步骤中,选择所需要的优良个体,并利用植物组织细胞培养技术以蒴果(内含种子)为材料对这些个体进行扩繁获得后代,然后选择3个不同种植地区进行耐寒铁皮石斛稳定性试验,选出耐寒且稳定的优良后代培育成新品系;
IV.运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良种苗的扩繁
运用植物组织细胞培养技术根据II(i)的方法与条件以蒴果(内含种子)进行新品系快速繁殖,得到耐寒稳定且有效成分含量测定高的铁皮石斛优良种苗。
3.根据权利要求1所述的三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法,其特征在于具体步骤如下:
I:铁皮石斛杂交育种
i.收集挖三清山野生铁皮石斛30份种质,同时收集霍山米斛30份种质;
ii.以三清山野生铁皮石斛粗壮植株为母本,以霍山米斛粗壮植株为父本,进行杂交,得到蒴果,实施例中,经对所收集铁皮石斛种质进行培育,经植株间比较,选出整体表现较好、有效成分含量高的植株作为新本进行杂交,选择整体表现较好的标准为:株高、茎秆形状和粗壮度、节间纵纹颜色、叶片颜色这类外观指标;有效成分含量的标准是:含铁皮石斛多糖即以含葡萄糖计不得少于25.0%,含甘露糖为13.0-38.0%,实施例中的杂交是指在花期采用人工授粉的形式进行;
II:铁皮石斛群体改良
i.将I(i)得到的蒴果播种在植物组织细胞培养基上萌发、培养,得到铁皮石斛植株,即为基础群体,铁皮石斛蒴果的标准为10-11月份选取外表发黄但未开裂、饱满的蒴果,操作方法为:把果实放入干净的消毒容器中,加入75%酒精浸泡消毒果实,30秒后,将酒精倒出,再加入0.1%生汞进行果实表面消毒,轻摇容器,使果实灭菌彻底,然后倒出生汞液体,再用无菌水冲洗4~5次,采用MS培养基+香蕉汁30g/L+0.5mg/L NAA+白糖30g/L+花宝3g/L为基质,培养温度30±2℃,相对湿度60-80%,每天光照8-12h,光照强度1000-2000LX,待种子萌发后,再转接至1/2MS+香蕉汁30g/L+白糖30g/L+花宝3g/L培养基上进行原球茎诱导增殖,然后转接至MS+土豆汁30g/L+白糖30g/L+花宝3g/L+NAA0.2mg/L的培养基上进行分化成苗,最后转接至MS+0.2mg/L NAA+30g/L土豆汁的培养基上进行壮苗生根,经炼苗后即可作为大田用苗使用;
ii.将基础群体置入人工模拟气候箱中进行培养,调节温度控制,使气候箱中的温度每天从0℃上升至30℃,且0℃应保持2小时,根据基础群体在人工气候箱中的长势和有效成分含量由高到低的顺序选出优良单株36个;
iii.以ii中选出的优良单株36个的茎段或者根茎进行植物组织细胞培养扩繁,获得36个单株的优良后代个体,进行扩繁所用的培养基与培养条件同ii;
iv.选择玉山、德兴、婺源3个环绕三清山的种植区进行铁皮石斛单株优良后代的比较试验,根据试验结果,从36个后代系中选择出整体表现较好、有效成分含量高的的优良后代10个,除去未中选的所有铁皮石斛植株,并将中选的10个优良后代分别疏去部分植株,并进行相间移植,使其获得充分受粉,种子成熟后混收种子,即为改良群体;
III:运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良品系选育
在群体改良的第四个步骤中,选择所需要的优良个体,并利用植物组织细胞培养技术以茎段或根茎为材料对这些个体进行扩繁获得后代,然后选择3个不同种植地区进行耐寒铁皮石斛稳定性试验,选出耐寒且稳定的优良后代培育成新品系;
IV.运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良种苗的扩繁
运用植物组织细胞培养技术根据II(i)的方法与条件以茎段或根茎为材料进行新品系快速繁殖,得到耐寒稳定且有效成分含量测定高的铁皮石斛优良种苗。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江西瀚野农业开发有限公司,未经江西瀚野农业开发有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510008368.7/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:一种龙眼的快速繁殖方法
- 下一篇:一种霍山石斛的快繁方法