[发明专利]一种三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法。

背景技术

铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo属兰科石斛属多年生附生草本植物，又称黑节草，是一种珍贵的药用植物，自古以来被认为是滋阴补益的珍品，并被道家养生经典《道藏》誉为“中华九大仙草之首”，民间则称其为“救命仙草”，《中国药典》称其具有“益胃生津，滋阴清热”功效，用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软；现代研究表明，铁皮石斛含有多糖、生物碱、氨基酸等成分，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效，现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用，目前，国内以铁皮石斛为原料和配丛的产品有数十种，如石斛夜光丸、石斛片等。

我国出产的野生铁皮石斛主要分布在秦岭淮河以南的安徽、湖南、云南、贵州、广东、广西、福建、江西、浙江等地区，其中又以云南最多，秦岭淮河的最低温度可超过-20℃，大多数1月份的气候在0℃左右。

野生铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中，主要分布于安徽、江西、浙江、福建、广东、广西、云南等省，由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝，为了保护和发展铁皮石斛资源，充分发挥铁皮石斛巨大的资源优势，浙江、江西、安徽、云南、四川等地纷纷开展铁皮石斛的人工种植，人工种植铁皮石斛一般控制室温在日温5℃～30℃，夜温15～20℃，即铁皮石斛适宜的生长温度，但在铁皮石斛的种植过程中，特别是江西、安徽等山区，药农们在种植铁皮石斛过程中，常因局部低温超过0℃以下导致铁皮石斛长势差、品质无法保证等问题，因此，选育出品质纯正、适合这些区域人工栽培的耐寒铁皮石斛优良新品种是势在必行。

铁皮石斛种子极小，无胚乳，自然繁殖率极低，加之价格过高导致的过度采挖以及自然环境的变化，野生铁皮石斛已经濒临灭绝，被列为国家二级保护植物。

目前国内已有浙江、广东、云南等省的科研单位与企业，对铁皮石斛开展了人工选育研究，选育出仙斛1号、仙斛2号、中科1号、红鑫1号等新品种(系)，这些新品种(系)都是一些全同胞或半同胞家系，即对特定新本进行自交或杂交后，再用其蒴果(种子)繁殖形成下一代种苗群体，且选育这些新品种(系)的主要目的是高产优质，对于抗性方面的研究未见公开报道。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法，使铁皮石斛改良群体的整体表现、有效成分含量得到提高，同时优良单株的出现频率大幅度提高。

为了实现上述目的，本发明的一种三清山耐寒铁皮石斛种苗培育方法，通过铁皮石斛杂交育种→铁皮石斛群体改良→铁皮石斛优良品系选育→铁皮石斛优良种苗的扩繁，具体步骤如下：

I：铁皮石斛杂交育种

i.收集三清山野生铁皮石斛，同时收集霍山米斛；

ii.以三清山野生铁皮石斛粗壮植株为母本，以霍山米斛粗壮植株为父本，进行杂交，得到蒴果；

II：铁皮石斛群体改良

i.将I(i)得到的蒴果播种在植物组织细胞培养基上萌发、培养，得到铁皮石斛植株，即为基础群体；

ii.将基础群体置入人工气候箱中进行培养，调查人工气候箱的温度设置，使每天的气温变化从0℃逐步上升至30℃，其中0℃保持2小时，然后根据基础群体在人工气候箱中的整体表现和有效成分含量由高到低的顺序选出优良单株；

iii.以ii中选出的优良单株进行植物组织细胞培养扩繁，获得优良个体；

iv.选择一个以上种植区进行铁皮石斛单株优良后代的比较试验，控制植株之间合理的生长距离，从而选出优良个体，继续培养或种植，待种子成熟后混收种子，即为改良群体；

III：运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良品系选育

在步骤II得到的改良群体中选择所需要的优良个体，并利用植物组织细胞培养技术对这些个体进行扩繁获得后代，选择一个以上地区进行耐寒铁皮石斛稳定性试验，选出优良后代培育成新品系；

IV.运用植物组织细胞培养技术进行铁皮石斛优良种苗的扩繁

运用植物组织细胞培养技术将步骤III中所得的新品系快速繁殖，得到耐寒稳定且有效成分含量测定高的铁皮石斛优良种苗。

上述技术方案中，步骤I(i)分步中所用的铁皮石斛母本为三清山野生铁皮石斛，父本为霍山米斛。