[发明专利]一种特异性蛋白检测β-葡聚糖的比浊法无效

专利信息
申请号: 201510011372.9 申请日: 2015-01-09
公开(公告)号: CN104502612A 公开(公告)日: 2015-04-08
发明(设计)人: 于源华;田振华;李忠和;南航;钟晓骝;张爽;刘桂莹;刘凯 申请(专利权)人: 长春理工大学
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68
代理公司: 长春众益专利商标事务所(普通合伙)22211 代理人: 纪尚
地址: 130022吉林省长春市朝*** 国省代码: 吉林;22
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摘要:
搜索关键词: 一种 特异性 蛋白 检测 聚糖
【权利要求书】:

1.一种特异性蛋白检测β-葡聚糖的比浊法,其方法是:利用基因重组的方法,克隆了来自鲎血中基因的大小为1251bp的特定氨基酸序列,将此序列连接到PET-15b的表达质粒上,转到BL21的表达菌中大量表达并纯化,该蛋白与β-葡聚糖具有特异结合性,建立一种检测β-葡聚糖的比浊法。

2.如权利要求1所述的一种特异性蛋白检测β-葡聚糖的比浊法,其方法是:表达蛋白与β-葡聚糖特异性结合,形成一定结构的复合物,在促聚剂聚乙二醇作用下,成为悬浮于反应溶剂中的微粒,使样品浊度发生变化;当一定波长光线通过浊度发生变化的反应混合物时,由于复合物的吸光度增大,故在一定范围内吸光度与复合物量呈正相关;当蛋白质浓度固定时,样品的浊度与其中所含β-葡聚糖量成正比,绘制标准曲线,从而达到未知β-葡聚糖的测定。

3.如权利要求2所述的一种特异性蛋白检测β-葡聚糖的比浊法,其方法是:采用粒径为180nm的大颗粒聚乙二醇微乳颗粒,增加β-葡聚糖和此特异蛋白反应时的浊度,从而增加测试反应的灵敏度、缩短了反应时间,在570nm的波长下进行检测;用固定的特异蛋白质浓度测定不同β-葡聚糖量,测出吸光值,绘制曲线,得到一定范围内的标准曲线,可以求出未知β-葡聚糖的量。

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