[发明专利]一种碳纳米管/纳米金复合膜电化学免疫传感器及其应用

权利要求书

1.一种电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：

（1）碳纳米管/纳米金复合膜的制备：

玻碳电极用Al₂O₃抛光至镜面，依次用丙酮、硝酸溶液、氢氧化钠溶液及二次蒸馏水超声清洗5 min；将处理好的玻碳电极吹干后，滴涂碳纳米管溶液并在红外灯下烘干；然后把制得的玻碳电极/碳纳米管电极放入含有0.10 mmol/L 氯金酸的硫酸溶液（0.50 mol/L）中，用多电位阶跃的方法在电极表面沉积纳米金制备玻碳电极/碳纳米管/纳米金电极，待用；

（2）基于微囊藻毒素-（亮氨酸-精氨酸）抗体的电化学免疫传感器的制备

电极用二次蒸馏水清洗并吹干后，滴涂10 μL微囊藻毒素抗体并在37oC条件下孵育60 min，然后用磷酸缓冲溶液（PBS）清洗电极以除去未结合的抗体并晾干；在电极表面滴加10 μL 2%牛血清白蛋白溶液并培养30 min以封闭活性位点，构建电化学免疫传感器。

2.根据权利要求1所述的一种电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于玻碳电极Φ=3 mm；硝酸溶液浓度为1.0 mol/L、氢氧化钠溶液浓度为1.0 mol/L。

3.根据权利要求1所述的一种电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于含有0.10 mmol/L 氯金酸的硫酸溶液浓度为0.50 mol/L。

4.根据权利要求1所述的一种电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于用多电位阶跃的方法，在1.055 ~ –0.045 V 的阶跃电位范围内扫描15 s。

5.权利要求1所述的电化学免疫传感器检测微囊藻毒素的方法，其特征在于按照下述步骤进行：

（1）“三明治”免疫分析模式的建立

免疫传感器清洗并吹干后，将其放入一定浓度的微囊藻毒素溶液中，在37 oC下培养60 min；用PBS清洗电极后，将10 μL辣根过氧化物标记微囊藻毒素抗体涂于电极表面并培养60 min构建“三明治”免疫分析模式；

（2）电化学检测：

用水清洗电极并将其放入5 mL含有0.80 mmol/L双氧水和0.50 mmol/L对苯二酚的PBS中，用微分脉冲伏安法进行定量检测，扫描范围为 0.40 ~ –0.6 V;

以对苯二酚为电子媒介体，通过辣根过氧化物酶催化双氧水产生的响应电流实现了对微囊藻毒素的检测;所有测试均在室温下进行。