[发明专利]从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法

权利要求书

1.一种从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）原料准备：将普通油茶叶洗净并去除杂质，自然风干，粉碎得普通油茶叶粉备用；

（2）提取：将普通油茶叶粉用体积分数20～80%的乙醇溶液进行加热浸提，过滤得提取液，将提取液浓缩至体积为浓缩前的30～50%，得浓缩液；

（3）分离纯化：将步骤（2）所得浓缩液的2.0～3.5BV过大孔树脂，吸附完成后，用2～6 BV蒸馏水，1～8 BV 体积分数15～25%的乙醇溶液，0.5～6 BV体积分数45～55%的乙醇溶液，0.5～6 BV体积分数75～85%的乙醇溶液依次洗脱，分别收集洗脱液，将体积分数45～55%和75～85%的乙醇溶液洗脱液合并，得洗脱液混合物；

（4）硅胶分离：将步骤（3）所得洗脱液混合物浓缩后进行硅胶层析，然后选用二氯甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度递减的混合溶液作为洗脱剂先后进行洗脱，分段收集洗脱液，经过液相色谱检测，合并含有3,5,4’-三羟基联苄的馏分段，命名为第一顺序组分；合并含有1-(3’,5’-二甲氧基)苯基-2 -[4’’-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-O-α-L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的馏分段，命名为第二顺序组分；

（5）液相制备：将步骤（4）所得第一顺序组分浓缩后用氮吹仪吹干，用相当于其1～2倍量mL/g的二甲基亚砜溶解，进行液相色谱检测，采用液相半制备收集3,5,4’-三羟基联苄的馏分，干燥得3,5,4’-三羟基联苄。

2.根据权利要求1所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：将步骤（4）所得第二顺序组分浓缩后用氮吹仪吹干，用相当于其1～2倍量mL/g的二甲基亚砜溶解，进行液相色谱检测，采用液相半制备收集1-(3’,5’-二甲氧基)苯基-2-[4’’-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-O-α-L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的馏分，干燥得1-(3’,5’-二甲氧基)苯基-2-[4’’-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-O-α-L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷。

3.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述加热浸提中每克普通油茶叶粉加入1.5～6mL体积分数20～80%的乙醇溶液，浸提温度为50～80℃，浸提≥1次，每次1～3h。

4.根据权利要求3所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述加热浸提中每克普通油茶叶粉加入2～3mL体积分数45～65%的乙醇溶液，浸提温度为60～70℃，浸提2～4次，每次2h。

5.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为40～50℃，真空度为0.08～0.09MPa；步骤（4）中，所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为35～45℃，真空度为0.08～0.09MPa，浓缩后浓缩液中固含量为34～36%；步骤（5）中，所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为30～40℃，真空度为0.08～0.09MPa，浓缩至溶剂完全蒸发。

6.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（3）中，用3～4 BV蒸馏水，4～6 BV体积分数15～25%的乙醇溶液，1～2 BV体积分数45～55%的乙醇溶液、1～2 BV体积分数75～85%的乙醇溶液依次洗脱。

7.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述二氯甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度递减的混合溶液中体积配比依次为7～9:1:0.1、6～8:1:0.1、4～6:1:0.1，洗脱体积分别为0.8～1.2BV、2.5～3.5BV、1.5～2.5BV。

8.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（3）、（4）中，所述洗脱的流速为0.5～1.5BV/h。

9.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述大孔树脂为D-101型大孔树脂。

10.根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述大孔树脂的用量为9～11L，大孔树脂填充的径高比为1:4.5～5.5；步骤（4）中，所述硅胶的用量为0.8～1.2L，硅胶填充的径高比为1:4～5。