[发明专利]从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分离联苄类化合物的方法，具体涉及一种从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法。

背景技术

我国生长的油茶主要有以下几种：普通油茶（Camellia oleifera Abel）约占总面积的98 %，其次为浙江省的浙江红花油茶、云南省的腾冲红花油茶、广东省和广西的南山茶等。油茶研究大多着眼于油茶果或其种质资源，每年四五月间打叶产生的大批落叶造成了很大的资源浪费。

研究表明，油茶叶成分组成复杂，含有脂肪、还原糖、蛋白质、氨基酸、酸、灰分、叶绿素、茶皂素和黄酮类物质等成分，其活性成分具有抗氧化、抗自由基、抑菌保鲜，及抗癌、防癌等功效。近年来，油茶活性成分的研究瓶颈在于提取方法及分离纯化技术的落后，不能很好的实现油茶中活性成分的高效提取或分离。

3,5,4’-三羟基联苄又名二氢白藜芦醇，CAS#58436-28-5，分子式为 C₁₄H₁₄O₃，分子量为230，其结构式如下所示：

Gakh A A（2010年）和Anisimova N Y（2011年）等研究发现二氢白藜芦醇相对于反式白藜芦醇和顺式白藜芦醇具有两相效应。Anisimova N Y（2011年）的结论是：1×10^-10～1×10^-7M浓度下二氢白藜芦醇对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3和DU-145具有增殖作用，高浓度（1×10^-5～1×10^-3 M）下二氢白藜芦醇具有明显的增殖抑制作用。

二氢白藜芦醇的在天然产物中报道非常少，二氢白藜芦醇主要作为白藜芦醇摄入后在血浆、尿和粪便中的代谢产物而开展研究，需要的实验试剂二氢白藜芦醇常常用氢化白藜芦醇的方法获得。至今为止，从天然植物中提取二氢白藜芦醇的文章不超过20篇，主要报道的有地钱、球茎石豆兰、良木坡垒木的干材、龙脑香科植物、怀槐木、杯鞘石斛等植物及部位。二氢白藜芦醇作为天然产物发现最早是1984年，El-Feraly F S. 用95%乙醇提取，氯仿溶解部分再用10%的甲醇及正己烧分溶，取甲醇溶解物进行层析，以含4%乙醇的氯仿展开，得到二氢白藜芦醇；Adesanya S A等（1989年）对感染可可球二孢的黄药子的珠芽和块茎用乙酸乙酯提取分离得到了主要的植物抗毒素二氢白藜芦醇；在葡萄酒中；是近年才检测到二氢白藜芦醇的，其原因在于其数量比反式白藜芦醇和顺式白藜芦醇数量少；2009年Király-Véghely Z等用加压薄层分离的方法检测到了二氢白藜芦醇，ikulski D（2010年），Rodríguez-Cabo T（2014年）用固相微萃取浓缩的方法检测到了红酒中的二氢白藜芦醇。然而，加压薄层的方法分离复杂样品非常困难，主要适合用于定性分析，用于制备仍然有难度；而固相微萃取处理的样品量少，不适合工业应用。

1-（3’,5’-二甲氧基）苯基-2-[4’’-O-β-D-吡喃葡萄糖基（6→1）-O-α-L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷，CAS#: 1338076-61-1，分子式为C₂₈H₃₈O₁₂，分子量为566，其结构式如下所示：

2011年Chen Yue Long等首次在油茶叶中发现了该新物质；其制备方法是将4.5kg晒干的油茶叶用95%的乙醇回流萃取，过滤。将乙醇提取液蒸发浓缩至220g，将浓缩液用石油醚、乙酸乙酯从水中萃取。利用乙酸乙酯萃取物进行柱层析，乙醇提取液经柱层析分离出6个主馏分，冲洗液分别为CHCl₃/MeOH（100:1，50:1，30:1，15:1，10:1，5:1）。CHCl₃/MeOH（10:1）组分用sephadex LH-20柱，用MeOH/H₂O（1:1）洗脱得到该化合物，得率为4mg/kg。该化合物为植物的次生代谢产物，是植物在逆环境下形成的抗毒素，植物多酚的含量与生长环境相关，该文献中的样品不能再现。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种提取率或分离率高，产品纯度高，制备工艺简便，适于工业生产的从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，包括以下步骤：

（1）原料准备：将普通油茶叶洗净并去除杂质，自然风干，粉碎得普通油茶叶粉备用；