[发明专利]一种树突状细胞的制备方法、所得树突状细胞

权利要求书

1.一种树突状细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：获得间充质干细胞；

步骤2：取所述间充质干细胞，贴壁培养后，得贴壁细胞；

步骤3：培养、诱导所述贴壁细胞，收集树突状细胞。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中的所述诱导所用诱导试剂包括第一诱导试剂和第二诱导试剂；

所述第一诱导试剂包括GM-CSF、IL-4、胎牛血清和谷氨酰胺；

所述第二诱导试剂包括TNF-α。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一诱导试剂中，所述GM-CSF的浓度为100ng/mL～200ng/mL。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，所述第一诱导试剂中，所述IL-4的浓度为30ng/mL～50ng/mL。

5.根据权利要求2至4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第一诱导试剂中，所述胎牛血清的浓度为10％。

6.根据权利要求2至5中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第一诱导试剂中，所述谷氨酰胺的浓度为2mmol/L～4mmol/L。

7.根据权利要求2至6中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第二诱导试剂中，所述TNF-α的浓度为500UI/mL～1500UI/mL。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述培养、诱导包括：

向所述贴壁细胞中加入含所述第一诱导试剂的培养液，培养；补加所述培养液，再加入含所述第二诱导试剂的培养液；收集树突状细胞。

9.根据权利要求1至8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述收集树突状细胞为：

将诱导并促熟后的树突状细胞离心清洗后吸去上清，加入1mL细胞冻存液，混匀后冻存于2mL的冻存管中，置于冻存盒中，放入-80℃冰箱，次日转入液氮保存；所述细胞冻存液包括20％人血白蛋白、无血清培养基和DMSO，所述20％人血白蛋白、无血清培养基和DMSO的体积比为5:4:1。

10.如权利要求1至9中任意一项所述的制备方法制备获得的树突状细胞。