[发明专利]一种低pH值胁迫提高ε‑聚赖氨酸产量的方法有效
申请号: | 201510021744.6 | 申请日: | 2015-01-15 |
公开(公告)号: | CN104498552B | 公开(公告)日: | 2017-12-29 |
发明(设计)人: | 陈旭升;毛忠贵;任喜东;张建华;张宏建;唐蕾;王珂 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P13/02 | 分类号: | C12P13/02;C12R1/465 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 ph 胁迫 提高 赖氨酸 产量 方法 | ||
1.一种低pH值胁迫提高ε-聚赖氨酸产量的方法,其特征在于,在ε-聚赖氨酸发酵过程前期引入酸性pH值胁迫策略;所述酸性pH值胁迫策略是使发酵液pH降为2.5-3.0,并维持12-48h,随后将pH调为3.5-4.5并保持稳定直到发酵结束。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在发酵前期人为或自发地使发酵液pH值从起始7.0下降至2.5-3.0,维持12-48h后,将pH上调至3.5-4.5,维持稳定直到发酵结束。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在ε-聚赖氨酸发酵开始后,先让发酵液pH自发下降至5.0,并控制pH在5.0直至菌体量倍增,然后人为或自然地使pH降为2.5-3.0,并维持12-48h,随后将pH调为3.5-4.5并保持稳定直到发酵结束。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:(1)将ε-聚赖氨酸产生菌链霉菌的种子液接种到以甘油和/或葡萄糖为碳源的发酵培养基中,通过发酵罐进行培养;(2)当pH从起始的7.0自发下降至5.0时,通过碱溶液将pH维持在5.0-6.0,直至菌体干重倍增;(3)在菌体量倍增后,人为或自然地使pH降至2.5-3.0,并维持12-48h,随后通过流加碱溶液将pH调为3.5-4.5并保持稳定,直到发酵结束。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:(1)将保藏的ε-聚赖氨酸产生菌链霉菌孢子,接种到M3G培养基中,30℃培养24h作为种子液;(2)将种子液以8%的接种量接种到以甘油和/或葡萄糖为碳源的发酵培养基中,通过发酵罐进行培养;(3)当pH从起始7.0自发下降至5.0时,通过蠕动泵自动添加碱溶液将pH维持在5.0-6.0,直到菌体干重倍增;(4)在菌体量倍增后,人为或自然地使pH降为2.5-3.0,并维持12-48h,随后通过流加碱溶液将pH调为3.5-4.5并保持稳定,直到分批或补料-分批发酵结束。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,生产菌是芽孢杆菌属的ε-聚赖氨酸产生菌或链霉菌属的ε-PL产生菌。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,ε-聚赖氨酸的其他发酵条件为:发酵温度30-37℃,通气量为0.5-2vvm,搅拌转速为200-800rpm。
8.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,调节pH的所述碱溶液为2-4mol/LNaOH或12.5%-25%氨水。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵是分批发酵或补料-分批发酵。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的补料-分批发酵包括流加甘油、葡萄糖或二者混合物以及硫酸铵溶液。
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