[发明专利]基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸及其用途

权利要求书

1.一种基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸，其结构式如式VII、式VIII或式IX所示：

2.一种如权利要求1所述的基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸中的偶氮连接单元，其结构式如式III、式IV或式V所示：

3.一种如权利要求1所述的基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

将权利要求2所述的偶氮连接单元III、IV、V中的氨基与荧光素的羧基在缩合剂作用下发生缩合反应形成酰胺化合物：

上述酰胺化合物中的叠氮基与

dUTP-P中的炔基发生点击反应，即得所述基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸IX、VIII、VII，IX、VIII、VII具体结构如权利要求1所示。

4.一种如权利要求2所述的偶氮连接单元的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

将化合物A在浓盐酸和亚硝酸钠的作用下进行重氮化反应后，与化合物B在氢氧化钠、乙醇和水的混合溶液反应得到化合物C其中R＝H、COOH、COOMe；将化合物C在三氟乙酸中脱保护基，得到偶氮连接单元III、IV、V。

5.一种如权利要求1中所述的基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸在DNA测序中的用途。