[发明专利]一种检测细菌氨基糖苷类耐药基因的引物及试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测细菌氨基糖苷类耐药基因的引物，其特征在于，它包括如下引物对：

(1)扩增aac(3)-II耐药基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示；

(2)扩增aac(6')-Ib耐药基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3～4所示；

(3)扩增aph(3')-III耐药基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5～6所示；

(4)扩增ant(3”)-1a耐药基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO：7～8所示；

(5)扩增ant(4')-1a耐药基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO：9～10所示；

上述5对引物对在一次检测中共同使用。

2.权利要求1所述的用于检测细菌氨基糖苷类耐药基因的引物在制备检测细菌氨基糖苷类耐药基因的试剂中的应用。

3.一种检测细菌氨基糖苷类耐药基因的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括如下试剂：

(1)PCR反应液：该PCR反应液中含有DNA聚合酶、EvaGreen荧光染料、Mg²⁺、PCR反应缓冲液、dATP、dCTP、dTTP和dGTP；

(2)引物混合液：将SEQ ID NO：1～10所示的10种引物混合，用双蒸水溶解，每条引物的浓度为1μmol/L；

(3)阳性对照：分别含有aac(3)-II、aac(6')-Ib、aph(3')-II、ant(3”)-1a和ant(4')-1a耐药基因的五种细菌基因组DNA和大肠杆菌基因组DNA的水溶液；

(4)阴性对照：大肠杆菌基因组DNA的水溶液。

4.根据权利要求3所述的检测细菌氨基糖苷类耐药基因的试剂盒，其特征在于，阳性对照中，每一种含耐药基因的细菌基因组DNA浓度为10ng/μL，大肠杆菌基因组DNA浓度为50ng/μL。

5.根据权利要求3所述的检测细菌氨基糖苷类耐药基因的试剂盒，其特征在于，阴性对照中，大肠杆菌基因组DNA的浓度为100ng/μL。