[发明专利]不同种属微生物间种类和丰度比较的人工外源性参照分子

权利要求书

1.不同种属微生物间种类检测和丰度比较的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、根据待检测微生物设计人工外源性参照分子，纯化提取待检测样本核酸，将已知量的外源性参照分子加入待测样本核酸；

步骤2、充分混匀后按照所需要检测的种属的数量，均等分成相应的份数，每一份分别使用试剂盒进行PCR扩增，并进行后续测序、酶切或其他DNA序列分析；

步骤3、每个物种的定量或相对定量分析结果，以人工外源性参照分子的检测量为基准，求得各种类的微生物相对于该人工外源性参照分子的相对量，进行数据标准化；

步骤4、物种间标准化后的数据可以进一步相互比较，以得到物种间的相对种类和丰度的数据；

所述的人工外源性参照分子包括：若干物种检测区及若干连接序列区，所述物种检测区与连接序列区相间排列交替出现；所述物种检测区的个数至少为两个，且为不同种属物种检测区；所述连接序列区的序列与待检测物种的序列不同源；所述物种检测区包括引物序列区与特异识别区，位于特异识别区上游的为上游引物序列区，位于特异识别区下游的为下游引物序列区；所述特异识别区为人为设计合成的一组序列，设计者明确知道该序列的排列信息，该序列的长度模拟相应待检测物种的特征检测序列长度；所述特异识别区的序列与待检测物种中的基因组DNA序列无同源性，存在明显特异区别；

所述的特征检测序列为来自所述微生物的16SrDNA 、18SrDNA 或ITS区rDNA 序列。