[发明专利]pHAb-FAST人源抗体表达载体系统及其使用方法

权利要求书

1.一种pHAb-FAST人源抗体表达载体系统，包括pHAb-FAST 1载体和pHAb-FAST 2载体，所述pHAb-FAST 1载体包含依次排列的EF1α启动子，人抗体轻链信号肽序列和人抗体重链恒定区序列；所述pHAb-FAST 2载体包含依次排列的人抗体轻链恒定区序列、IRES序列和人抗体重链信号肽序列。

2.根据权利要求1所述的表达载体系统，其特征在于，所述pHAb-FAST 1载体中，EF1α启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；人抗体轻链信号肽序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；人抗体重链恒定区序列的核苷酸序列为如SEQ ID NO：5所示。

3.根据权利要求1所述的表达载体系统，其特征在于，所述pHAb-FAST 2载体中，人抗体轻链恒定区序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；IRES序列的核苷酸序列为如SEQ ID NO：7所示；人抗体重链信号肽序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示。

4.根据权利要求1所述的表达载体系统，其特征在于，所述pHAb-FAST 1载体的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述pHAb-FAST 2载体核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

5.一种试剂盒，包括如权利要求1-4任一权利要求所述的pHAb-FAST人源抗体表达载体系统。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括以下特征中任一项或多项：

(1)所述试剂盒还包括引物对1，引物对1是反向PCR引物，用于将pHAb-FAST 1载体的人抗体轻链信号肽序列和人抗体重链恒定区序列之间打开。

(2)所述试剂盒还包括引物对2，引物对2用于从pHAb-FAST 2载体中获取包含人抗体轻链恒定区序列、IRES序列和人抗体重链信号肽序列的特定片段。

(3)所述试剂盒还包括用于制备引物对3的核苷酸序列，引物对3包括引物对3正向引物和引物对3反向引物，引物对3具有扩增待用抗体轻链可变区序列的功能；引物对3的正向引物具有在待用抗体轻链可变区序列5’端添加与人抗体轻链信号肽序列3’端相重叠的序列的功能，引物对3的反向引物具有在待用抗体轻链可变区序列3’端添加与人抗体轻链恒定区序列5’端相重叠的序列的功能。

(4)所述试剂盒还包括用于制备引物对4的核苷酸序列，引物对4包括引物对4正向引物和引物对4反向引物，引物对4具有扩增待用抗体重链可变区序列的功能，引物对4的正向引物具有在待用抗体重链可变区序列5’端添加与人抗体重链信号肽序列3’端相重叠的序列的功能，引物对4的反向引物具有在待用抗体重链可变区序列3’端添加与人抗体重链恒定区序列5’端相重叠的序列的功能。

(5)所述试剂盒还包括末端引物对，末端引物包括末端引物正向引物和末端引物反向引物。

7.一种试剂盒，包括大片段1和小片段2，所述大片段1是以前述pHAb-FAST 1载体为模板，用前述引物对1进行PCR反应获得的，所述小片段2是以前述pHAb-FAST 2载体为模板，用引物对2进行PCR反应，获得的。