[发明专利]一种大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法

权利要求书

1.一种大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法，其特征在于：

1)大菱鲆精液灭活及人工受精：

取精液与卵子按体积比1:100-200比例进行授精，作为对照组；

另取精液用预冷的Ringer氏液稀释5-15倍，用剂量为36,000erg mm^-2的紫外线将精子灭活，取灭活后的精液与卵子按体积比1:10-20比例进行授精，作为诱导组；

2)染色体诱导加倍

以对照组受精卵出现第一次卵裂痕的时间作为诱导组受精卵出现第一次卵裂痕的时间，在诱导组第一次卵裂痕出现前10-20min，将步骤1)诱导组受精卵置于静水压机加压容器内，在55-75MPa静水压下进行压力休克处理，处理6～8min后泄压，取出受精卵，置于海水中继续培育。

2.按权利要求1所述的大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法，其特征在于：所述步骤1)中大菱鲆精液和卵子分别为选择性成熟的大菱鲆亲鱼，分别收集精液和卵，镜检其质量后，待用；

其中，精进行镜检，选择精子活力高于IV级的精液；卵进行镜检，选择圆球形，无色透明，油球集中的卵子。

3.按权利要求1所述的大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法，其特征在于：

所述对照组为取精液用新鲜海水激活后，迅速与卵子按体积比1:100-200混合均匀，随后补入卵子体积1-5倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲洗干净，置于卵子体积5-10倍量的新鲜海水中培育，受精后30min内再补加受精卵体积的10-15倍量新鲜海水，作为对照组；

所述诱导组为取精液用预冷的Ringer氏液稀释5-15倍，用剂量为36,000erg mm^-2的紫外线将精子灭活，待对照组人工受精15～25min后，灭活后的精液用新鲜海水激活，迅速与卵子按体积比1:10-20比例混合均匀，随后补入卵子体积1-5倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲洗干净，置于卵子体积5-10倍量的新鲜海水中培育，受精后30min内再补入卵子体积10-15倍量的新鲜海水，作为诱导组。

4.按权利要求1所述的大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法，其特征在于：

所述步骤1)中精液紫外灭活时温度保持在0～2℃。

5.按权利要求1所述的大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法，其特征在于：

所述步骤1)诱导组中精液紫外灭活、灭活精液与卵子进行授精及受精卵早期孵育过程均在黑暗避光处进行。