[发明专利]一种茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂及其制备方法与应用，属于化学技术领域。

背景技术

微管是细胞骨架的主要组成部分，由α-微管蛋白和β-微管蛋白异二聚体组成，具有聚合和解聚的动力学特性，在维持细胞形态、细胞分裂、信号转导及物质输送等过程中起着重要作用。

抗微管药物已经成为一类主要的化疗药物，广泛用于临床各类肿瘤的治疗中。微管蛋白抑制剂通过与微管蛋白上的特定位点结合，影响和干扰微管蛋白的聚合和解聚的动力学，进而阻断M期纺锤体的形成，使肿瘤细胞生长停滞于G2/M期。目前，临床上应用的微管抑制剂主要有以紫杉醇为代表的抑制微管蛋白解聚药物和以长春碱类为代表的抑制微管聚合药物。然而，上述药物毒副作用大、易产生耐药性，结构复杂，合成难度大等问题，寻找新型、高效、低毒的微管抑制剂已成为当今抗肿瘤药物研究的一个热点。

因此，设计合成结构新颖的小分子微管蛋白抑制剂，对于增强药物的特异性、有效性、减少毒副作用和防止耐药性等具有重要意义。

发明内容

针对上述现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂及其制备方法。

本发明的另一目的是提供该茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂，具有通式I所示的结构：

其中，R代表NH₂或NHOH。

本发明的茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂的制备方法，合成路线如下：

试剂与条件：(1)叔丁基二甲基氯硅烷(TBSCl)(2)3-乙氧基苯基异硫氰酸酯，二(三甲基硅基)氨基锂(LiHMDS)(3)甲基肼(4)四丁基氟化铵(TBAF)(5)氯乙酸甲酯，碳酸钾(6)氨水盐酸羟胺。

首先，以5-乙氧基-6-羟基-1-茚酮(式1)为起始原料，将6位羟基用叔丁基二甲基硅基保护，得到5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-1-茚酮(式2)，5-乙氧基-6-羟基-1-茚酮、叔丁基二甲基氯硅烷加入量的质量比为3.2:3.76。式2化合物与3-乙氧基苯基异硫氰酸酯发生亲电加成反应，然后再跟甲基肼发生加成-消除反应得到关键的茚并吡唑母核；5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-1-茚酮、3-乙氧基苯基异硫氰酸酯、甲基肼加入量的比为4.65g:3.17g:4mL。式4化合物脱去6位羟基上的保护基，然后与氯乙酸甲酯发生Williamson成醚反应得到N-(3-乙氧基苯基)-1H,4H-6-乙氧基-7-甲氧基甲酰甲氧基-1-甲基茚并[1,2-c]吡唑-3-胺(式6)，最后式6化合物上的酯基侧链，与不同的氨基取代基发生氨解反应得到目标化合物(结构式1，结构式2)。

本发明的茚并吡唑类小分子微管蛋白抑制剂，其具体合成步骤如下：

(1)将5-乙氧基-6-羟基-1-茚酮溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入咪唑，搅拌，然后加入叔丁基二甲基氯硅烷，搅拌；加入柠檬酸，放冷，抽滤，干燥，得5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-1-茚酮；5-乙氧基-6-羟基-1-茚酮、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷加入量的质量比为：3.2:1.7:3.76；

(2)将5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-1-茚酮溶于无水四氢呋喃中，冷却至﹣78℃，逐滴加入二(三甲基硅基)氨基锂，搅拌2h后，45min内升温至﹣45℃，加入溶于无水四氢呋喃中的3-乙氧基苯基异硫氰酸酯，室温，搅拌过夜；加入冰醋酸,搅拌，蒸除溶剂，二氯甲烷提取，洗涤，无水硫酸钠干燥，得5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-2-(3-乙氧基苯胺基硫代甲酰基)-1-茚酮粗品；5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-1-茚酮、3-乙氧基苯基异硫氰酸酯的质量比为4.65:3.17；

(3)将步骤(2)所得5-乙氧基-6-叔丁基二甲基硅氧基-2-(3-乙氧基苯胺基硫代甲酰基)-1-茚酮粗品溶于二氧六环和乙醇的混合溶剂中，0℃下，加入甲基肼，搅拌，室温下反应84h；蒸除溶剂，柱层析，得N-(3-乙氧基苯基)-1H,4H-6-乙氧基-7-叔丁基二甲基硅氧基-1-甲基茚并[1,2-c]吡唑-3-胺；