[发明专利]一种6,6’‑双(2,3‑二甲氧基苯甲酰基)‑α,α‑D‑海藻糖及其中间体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种6,6’-双(2,3-二甲氧基苯甲酰基)-α,α-D-海藻糖及其中间体的制备方法，属于有机合成技术领域。

背景技术

肿瘤侵袭是指恶性肿瘤细胞离开原发肿瘤向周围组织进攻，其标志是肿瘤细胞突破基底膜。肿瘤转移是指恶性肿瘤细胞脱离原发肿瘤，通过各种方式转移到其他组织或器官继续生长，形成与原发肿瘤相同性质的继发性肿瘤的过程。肿瘤侵袭是肿瘤转移的前奏，肿瘤转移是侵袭的继续和结果，二者密切相关。肿瘤侵袭与转移是恶性肿瘤的基本特征，是临床肿瘤患者(90％以上)死亡的最主要原因。如何防止和治疗肿瘤转移一直是肿瘤治疗的最大难关。目前采用的大多数抗肿瘤药物主要是抑制肿瘤细胞的增殖和杀伤肿瘤细胞，这对增殖期的肿瘤细胞特别有效，而对许多处于休眠或蛰伏期的肿瘤细胞无效；另外，肿瘤转移细胞增殖率较低，对常规的肿瘤化学疗法也不敏感。因此，研制开发有效的抗肿瘤侵袭与转移药物是抗肿瘤药物研究的重点领域之一。

6,6’-双(2,3-二甲氧基苯甲酰基)-α,α-D-海藻糖(DMBT-751，式I)是我们基于天然产物修饰的分子相似性、多样性的药物设计策略，对天然抗肿瘤侵袭化合物Brartemicin进行结构优化，通过构建结构多样性的海藻糖衍生物系列，筛选发现的高活性抗肿瘤侵袭与转移海藻糖衍生物。其结构式如下：

DMBT-751对鼠结肠癌26-L5细胞、人结肠癌SW620细胞、黑色素瘤B16-BL6细胞、乳腺癌MDA-MB-231等多种肿瘤细胞具有强的抗肿瘤侵袭活性，其IC₅₀为0.15-4.12μM。动物实验表明，口服给药DMBT-751(1mg/kg)，可有效抑制小鼠黑色瘤B16-BL6细胞的肺转移，抑制率在65％以上。抗肿瘤转移作用机制初步研究表明，DMBT-751能够抑制Akt的磷酸化，通过作用于Akt/GSK-3β/β-catenin和Akt/mTOR信号通路，下调MMP-9和VEGF的表达，抑制肿瘤新生血管的形成。因此，DMBT-751作用机制明确；初步毒性实验表明，在其抗肿瘤侵袭有效浓度的600倍时，仍无任何细胞毒性。因此，DMBT-751是一高效低毒的新型抗肿瘤侵袭与转移海藻糖衍生物，有望作为一类抗肿瘤转移候选药物，进行进一步开发应用研究。

中国专利和美国专利“海藻糖衍生物及其制备方法和应用”(中国专利申请号：2010102467922；美国专利授权号：US8,889,651B2)报道了以苄基为保护基合成DMBT-751的合成方法。但该合成方法中，由于苄基保护基需用催化氢化法，且难于完全脱去，需柱层析分离制备，不适合大规模生产；另外，该专利方法中采用偶氮二甲酸二异丙酯和三苯基膦为缩合试剂(Mitsunobu反应)，因生成的三苯氧磷难于除去，需柱层析分离制备，也不适合大规模生产。因此，开发一种反应条件温和，适合工业化生产DMBT-751的合成方法显得尤为重要。

发明内容

针对上述现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种6,6’-双(2,3-二甲氧基苯甲酰基)-α,α-D-海藻糖及其中间体的制备方法。反应条件温和，成本低廉，适合工业化生产。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种6,6’-双(2,3-二甲氧基苯甲酰基)-α,α-D-海藻糖中间体的制备方法，步骤如下：

(1)将2,3-二甲氧基苯甲酸溶于无水四氢呋喃中，加入N,N'-羰基二咪唑，室温搅拌，进行羧基活化；2,3-二甲氧基苯甲酸和N,N'-羰基二咪唑加入的质量比为(1.1-1.2):1；

(2)向步骤(1)羧基活化后的反应液中，加入式II所示的化合物和N-溴代丁二酰亚胺，搅拌反应；式II所示的化合物和N-溴代丁二酰亚胺加入的质量比为7.75:0.16；

(3)向步骤(2)反应后的溶液中加入水，搅拌10-15分钟，用二氯甲烷提取，合并有机层，用饱和碳酸钾水溶液洗涤，再用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤、浓缩，将浓缩后的残渣用乙醇-水混合溶液重结晶，得式III所示的化合物，即为6,6’-双(2,3-二甲氧基苯甲酰基)-α,α-D-海藻糖中间体。

所述乙醇-水混合溶液中，乙醇、水的体积比为2:1；

优选的，所述2,3-二甲氧基苯甲酸和N,N'-羰基二咪唑加入的质量比为1.1:1。

步骤(3)中，水的加入量与步骤(2)反应后的溶液的体积相同。

式II所示化合物按文献(The Journal of Antibiotics 2013,66,531–537)方法制备：