[发明专利]一种肺炎链球菌的荚膜染色方法在审
申请号: | 201510075085.4 | 申请日: | 2015-02-12 |
公开(公告)号: | CN104711315A | 公开(公告)日: | 2015-06-17 |
发明(设计)人: | 刘荷中;赵泽坤;翟振华 | 申请(专利权)人: | 北京华安科创生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/14 | 分类号: | C12Q1/14;C12R1/46 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 吴泳历 |
地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肺炎 链球菌 荚膜 染色 方法 | ||
1.一种用于肺炎链球菌的荚膜染色方法,包括以下步骤:
(1)制备细菌标本;
(2)涂片:取少量所述细菌标本,均匀涂于洁净载玻片上,刮成薄层,自然晾干;
(3)染色:滴加100-150μl的石碳酸复红染液于载玻片上,使之覆盖均匀,自然晾干;
(4)媒染:用水冲洗,自然晾干,滴加媒染剂,均匀覆盖3-5min,用水冲洗,自然晾干;
(5)镜检。
2.根据权利要求1所述的方法,所述石碳酸复红染液为:50mg/ml石碳酸复红溶液。
3.根据权利要求1所述的方法,所述媒染剂为:30mg/ml FeCl3溶液二份,150mg/ml单宁酸二份,200mg/ml硫酸铝钾饱和溶液五份,临用前三天混合,室温放置。
4.根据权利要求1所述的方法,所述细菌标本采用冻干的肺炎链球菌进行制备,制备方法为:取冻干的肺炎链球菌,用无菌生理盐水溶解,反复吹打混匀;将菌液滴加于10%羊血MH培养基上,涂布均匀,然后置于6%CO2培养箱中,37℃倒置培养16h-18h后,用生理盐水洗下,备用。
5.根据权利要求1所述的方法,其染色效果为:背景色为红色,菌体为紫色,荚膜呈无色或淡粉色透明圈。
6.权利要求1-5所述的方法在肺炎链球菌菌种鉴定中的应用。
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