[发明专利]一种光水解核酶及其制备和应用在审
申请号: | 201510075115.1 | 申请日: | 2015-02-12 |
公开(公告)号: | CN104818274A | 公开(公告)日: | 2015-08-05 |
发明(设计)人: | 廖正宇;廖世奇;王黎;袁红霞;王芳;田彩萍 | 申请(专利权)人: | 廖正宇 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/10;C12P3/00;C12M1/40;C12M1/00 |
代理公司: | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人: | 唐瑶 |
地址: | 730050 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水解 及其 制备 应用 | ||
1.一种光水解核酶,其特征在于:光水解核酶为序列表SEQ ID No.1 中的核酸序列所示。
2.如权利要求1所述一种光水解核酶的制备,其特征在于:
(1)核酶光水解反应体系:在10ml测定溶解氧的溶液中加入琼脂0.5克,微波加热3分钟;加入100μl水溶解的1 OD的寡核苷酸文库摇匀;将其倒入平铺平皿中,厚度在2mm,待冷却后形成固体核酶光水解反应体系;
(2)反应:将阳性反应平皿放入太阳下光照,阴性反应液放入避光处,反应6小时;
(3)筛选:将阴阳反应体系中蓝点做对比,并挑出阳性体系中的蓝点;
(4)提取蓝点琼脂中的寡核苷酸,并通过聚合酶链式反应扩增寡核苷酸为次级文库;
(5)将次级库重复1-4步骤3至12轮,得到富集的次级文库;
(6)将次级库转入质粒中,再转染大肠杆菌,挑取阳性克隆测序即为序列表SEQ ID No.1 中的核酸序列所示的光水解核酶。
3.如权利要求1所述一种光水解核酶应用于催化分解水的方法,其特征在于:所述反应条件为:在太阳光照射6-8小时,核酶催化水分解成氢气和氧气的反应方程式为: 。
4.如权利要求3所述一种光水解核酶应用于催化分解水的设备,其特征在于:主要包括光化反应板(1)、气体压缩器(2)、固定支撑(3)、进出水管线器(4);气体压缩器(2)由固定支撑(3)连接固定;所述光化反应板(1)倾斜放置通过进出水管线器(4)与气体压缩器(2)连接,光化反应板(1)的上端连接两个进出水管线器(4),一个进出水管线器(4)连接于气体压缩器(2)的底部,另一个进出水管线器(4)连接于气体压缩器(2)的顶部;光化反应板(1)的底端设置有排污开关(7)。
5.如权利要求4所述一种光水解核酶应用于催化分解水的设备,其特征在于:所述光化反应板(1)由两层粗面玻璃板形成一个具有内部空腔的结构,该空腔内由一层粗面玻璃板即中间层将其分隔成为一个三层两腔结构;所述形成空腔的粗面玻璃板板壁内侧附着一层核酶(8);中间层为透光板两面各附着一层核酶(8)。
6.如权利要求4所述一种光水解核酶应用于催化分解水的设备,其特征在于:所述光化反应板(1)为透光玻璃板。
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