[发明专利]一种癌症早期基因诊断试剂盒及诊断方法在审
申请号: | 201510076089.4 | 申请日: | 2015-02-13 |
公开(公告)号: | CN104928358A | 公开(公告)日: | 2015-09-23 |
发明(设计)人: | 冯宝章 | 申请(专利权)人: | 冯宝章 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300020 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 癌症 早期 基因 诊断 试剂盒 方法 | ||
1.一种癌症早期基因诊断试剂盒,其特征在于,试剂盒包含致病基因和癌变基因两对PCR引物;
其中,V-erbB PCR引物序列如下:
P1:5‘CAC TGT GTG AAG GCC TGC 3’;
P2:5‘CTT ATA AAT AGT GCC AAA AGC 3’;
TS引物序列根据TS基因编码区随机设计。
2.一种癌症早期基因诊断试剂盒的诊断方法,其特征在于,采用聚合酶链反应方法,即针对上述两个癌基因设计两对引物,会同其它试剂组合而成基因诊断试剂盒;
步骤1,骨髓细胞模板DNA的提取:用小刀将患者骨髓涂片上的细胞刮下来,收集于1.5ml EP管内,加入TEN(15Mm Tris,15mM EDTA,15mM Nacl,PH8.0)液500ul,10%SDS 75ul,蛋白酶K(2.0mg/ml)10ul,于55℃水浴中孵育5小时。
步骤2,聚合酶链反应条件:模板变性条件为97℃,7分钟,32个循环,每个循环中变性条件为94℃5分钟,退火条件为52℃,1分钟,延伸条件为72℃,2分钟,最后一次循环之后延伸时间为5分钟,取出置于4℃保存。
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