[发明专利]一种微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法和应用有效
| 申请号： | 201510078301.0 | 申请日： | 2015-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN104744485B | 公开（公告）日： | 2017-09-05 |
| 发明（设计）人： | 李武;李从发;刘四新;胡晓苹 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C07D491/20 | 分类号： | C07D491/20;A61P35/00 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司44202 | 代理人： | 郝传鑫,熊永强 |
| 地址： | 570228 *** | 国省代码： | 海南;46 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 微生物 发酵 高三尖杉酯碱 提取 方法 应用 | ||
1.一种微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)对微生物发酵物进行分离，得菌体和去除菌体的发酵液，将去除菌体的发酵液浓缩，调pH值为7.0-8.0，有机溶剂萃取得有机相并蒸干，采用原发酵液1/100-1/1000体积的复溶缓冲溶液溶解所得固体，得粗提液；其中，所述复溶缓冲溶液的pH为7.0-10.0；
(2)将步骤(1)所得粗提液采用大孔树脂进行吸附、解吸附得生物碱粗提取物，所述大孔树脂为NKA-9、HPD850、HPD450或D3520；所述大孔树脂的用量按如下比例添加：1g大孔树脂/5-50mL粗提液；所述的采用大孔树脂进行吸附的时间为0.5-2小时；所述解吸附所用缓冲液为pH为3.0-6.0的酸性解吸附缓冲溶液；
(3)步骤(2)所得生物碱粗提取物经高效液相纯化获得高三尖杉酯碱；
或步骤(2)所得生物碱粗提取物先经硅胶柱层析纯化得高三尖杉酯碱粗品；高三尖杉酯碱粗品再经高效液相纯化获得高三尖杉酯碱。
2.根据权利要求1所述的微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述有机溶剂为正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中，还包括菌体的处理方法为：先将菌体破壁；再调pH值为7.0-10.0，有机溶剂萃取后过滤；滤液蒸干后复溶于pH为3.0-10.0的缓冲液中，得粗提液。
4.一种微生物发酵高三尖杉酯碱的预提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)对微生物发酵物进行分离，得菌体和去除菌体的发酵液，将去除菌体的发酵液浓缩，调pH值为7.0-8.0，有机溶剂萃取得有机相并蒸干，采用原发酵液1/100-1/1000体积的复溶缓冲溶液溶解所得固体，得粗提液；其中，所述复溶缓冲溶液的pH为7.0-10.0；
(2)将步骤(1)所得粗提液采用大孔树脂进行吸附、解吸附得到含有高三尖杉酯碱的生物碱粗提取物，所述大孔树脂为NKA-9、HPD850、HPD450或D3520；所述大孔树脂的用量按如下比例添加：1g大孔树脂/5-50mL粗提液；所述的采用大孔树脂进行吸附的时间为0.5-2小时；所述解吸附所用缓冲液为pH为3.0-6.0的酸性解吸附缓冲溶液。
5.根据权利要求4所述的微生物发酵高三尖杉酯碱的预提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述有机溶剂为正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯中的一种或多种。
6.一种根据权利要求1所述的微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法或根据权利要求4所述的微生物发酵高三尖杉酯碱的预提取方法在制备抗肿瘤药物中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于海南大学，未经海南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510078301.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
