[发明专利]一种鉴定不同烟草品种的引物组、试剂盒及其方法有效
申请号: | 201510079604.4 | 申请日: | 2015-02-15 |
公开(公告)号: | CN104726564B | 公开(公告)日: | 2018-02-02 |
发明(设计)人: | 张建奎;陈婷婷;戴秀梅;曲存民;尹国英;袁洪 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 不同 烟草 品种 引物 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种试剂盒,其特征在于,包括以下引物组:
引物一,引物二,引物三和引物四的组合;或引物一、引物二、引物三、引物四、引物五和引物六的组合;或引物一、引物二、引物三、引物四、引物五、引物六和引物七的组合;
所述引物一由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2组成,
所述引物二由SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4组成,
所述引物三由SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6组成,
所述引物四由SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8组成,
所述引物五由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10组成,
所述引物六由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12组成,
所述引物七由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14组成。
2.权利要求1所述的试剂盒在鉴别烟草品种和/或鉴定不同烟草品种的亲缘关系中的用途。
3.一种鉴别烟草品种的方法,其特征在于,使用了权利要求1所述的试剂盒。
4.权利要求3所述鉴别烟草品种的方法,其特征在于,步骤为,
提取待检烟草的基因组DNA;
利用引物一、引物二、引物三和引物四对所述基因组DNA进行四重PCR,获得第一扩增产物,所述引物一由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2组成,所述引物二由SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4组成,所述引物三由SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6组成,所述引物四SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8组成;
利用所述第一扩增产物鉴别所述待检烟草的品种,获得第一鉴别结果;
任选的,还包括,
利用引物五和引物六对所述第一鉴别结果中未鉴别出的烟草的基因组DNA进行两重PCR,获得第二扩增产物,所述引物五由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10组成,所述引物六由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12组成,
利用第二扩增产物鉴别所述第一鉴别结果中未鉴别出的烟草的品种,获得第二鉴别结果;
任选的,还包括,
利用引物七对所述第二鉴别结果中未鉴别出的烟草的基因组DNA进行单重PCR,获得第三扩增产物,所述引物七由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14组成,
利用所述第三扩增产物鉴别所述第二鉴别结果中未鉴别出的烟草的品种,获得第三鉴别结果。
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