[发明专利]一种用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法

权利要求书

1.用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)提供一种或多种表达多个离子通道的活的生物细胞，所述细胞载有被分析物；

b)从所述细胞跨离子通道卸载至少部分所述被分析物；

c)使用x-射线荧光测量所述被分析物，其中所述x-射线荧光测量使用了装配有微聚集X-射线管的能量色散x-射线荧光分光仪；以及

d)重复步骤b)和c)，以便在一段时间内获得多个测量值。

2.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中测量x-射线荧光包括使用多色x-射线束激发被分析物，以及使用x-射线检测器测量x-射线荧光。

3.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中被卸载的被分析物从一个体积中去除，所述体积由入射到细胞上的x-射线荧光激发光束的面积，以及被分析物在水中的至少一种特征性信号的1/e衰减深度的5倍的深度来确定。

4.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，还包括在测量x-射线荧光前减少基质。

5.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中在使细胞装载被分析物之前，在一个体积中，被分析物被耗尽，所述体积由入射到细胞上的x-射线荧光激发光束的面积，以及被分析物在水中的至少一种特征性信号的1/e衰减深度的5倍的深度来确定。

6.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中被分析物包括选自锌，镉，铊，钠，钾，铷，铯，镁，钙，钡，锶，氯，溴和碘的化学元素。

7.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中细胞被保留在腔室中，其中所述腔室的至少一部分半透过或透过x-射线。

8.如权利要求7所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中所述腔室半透过x-射线的部分使被分析物位于半透过x-射线位置1微米内的部分所发射的，与半透过x-射线位置垂直，并且入射到半透过x-射线位置上的最高能量x-射线荧光信号的至少0.1％通过。

9.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中细胞为固定化的，以使得数量等于x-射线荧光测量开始时位于x-射线荧光激发光束的光路中的细胞的至少1％的细胞在x-射线荧光激发光束的光路中保留的时间大于x-射线荧光测量的测量时间。

10.如权利要求1所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中细胞为固定化的，以使得数量等于x-射线荧光测量开始时位于x-射线荧光激发光束的光路中的细胞的至少1％的细胞在x-射线荧光激发光束的光路中保留至少10s。

11.如权利要求2所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，还包括腔室，其中所述腔室和x-射线激发光束以及x-射线检测器的定位允许细胞群的至少一部分占据由x-射线激发光路与x-射线检测器的可视容积的交集所确定的体积。

12.如权利要求11所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中占据由x-射线激发光路与x-射线检测器的可视容积的交集所确定的体积的细胞群的所述至少一部分包括至少100pg被分析物。

13.如权利要求12所述的用于测量从活的生物细胞跨细胞膜转运被分析物的方法，其中细胞与x-射线荧光检测器之间的任何屏障使位于屏障的5μm内的被分析物发射的垂直于屏障的最高能量x-射线荧光信号的部分衰减小于99.9％，或允许来自被分析物的最高能量x-射线荧光信号的至少0.1％通过。