[发明专利]癌胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒

权利要求书

1.一种癌胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，包含以下各成分：癌胚抗原，R1试剂、R2试剂和校准品；所述的R1试剂包括以下各成分：MOPS缓冲液，BSA，表面活性剂，防腐剂；

各成分的用量为：

MOPS缓冲液 0.01M-0.1M；

BSA 0.1 wt %-1 wt %

表面活性剂 0.5 wt %-5 wt %

防腐剂 0.05 wt %-0.5 wt %；

其中，所述的MOPS缓冲液的pH值为7-8；

所述的R2试剂包括以下各成分：PBS缓冲液，CEA抗体包被的胶乳微球，BSA，表面活性剂，海藻糖和防腐剂；

各成分的用量为：

PBS缓冲液 0.01M-0.1M

CEA抗体包被的胶乳微球 1 wt %

BSA 0.1 wt %1%

表面活性剂 0.5 wt %-5 wt %

海藻糖 1 wt %-10 wt %

防腐剂 0.05 wt %-0.5 wt %

其中，所述的PBS缓冲液的pH值为7.4。

2.按照权利要求1所述的癌胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述的CEA抗体包被的胶乳微球通过下述方法制备得到：

（1）用MES缓冲液冲洗胶乳微球；

（2）在活性缓冲液中重悬胶乳微球；

（3）用MES缓冲液配制NHS和EDC；

（4）将NHS和EDC混合均匀，在室温下反应；

（5）用MOPS缓冲液冲洗反应产物并重悬在缓冲液中得到微球悬液；

（6）溶解CEA单克隆抗体于MOPS缓冲液中，将微球悬液和CEA单克隆抗体单抗溶液混合，室温下反应；

（7）冲洗反应产物后重悬于试剂R2缓冲液中，缓慢混合，超声使微球分散。

3.按照权利要求2所述的胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于：步骤（1）中用MES缓冲液冲洗100nm胶乳微球两次。

4.按照权利要求2所述的胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于：步骤（2）中重悬胶乳微球，使微球浓度为1 wt %，采用超声或者搅拌的方法确保微球重悬。

5.按照权利要求2所述的胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于：步骤（3）中用pH5.0的MES缓冲液配制NHS和EDC；其中，NHS或EDC的浓度为2.5mg/ml；步骤（4）中将NHS和EDC混合均匀，在18-25℃的室温下反应15分钟；步骤（6）中在18-25℃的室温下反应2-4小时。

6.按照权利要求1所述的癌胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于：所述的校准品通过以下方法制备得到：将人癌胚抗原重组蛋白溶于稀释液中制成6个浓度的校准品；以市售化学发光试剂盒分别检测10次，求出平均值，以此定为校准品浓度。

7. 按照权利要求6所述的癌胚抗原胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于：其中，所述的稀释液的成分包括：NaCl 0.9%，BSA0.5%，防腐剂0.7%；稀释液的pH值为7.4。