[发明专利]用于构建放射性同位素偶联标记的ADC药物的改造抗体IgG1-CH-N267C

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种用于构建放射性同位素偶联标记的ADC药物的改造抗体IgG1-CH-N267C。

背景技术

现代生物学证明癌症有很强的多样性，并且选择性不好的药物会对正常细胞产生很大的负作用。目前癌症新药研发局面缓慢，仍然有大量的癌症没有比较好的治疗办法。肝癌、肺癌、胰腺癌的五年存活率都在15％以下。当前癌症新药研发的平台大致分为单克隆抗体大分子生物药和小分子化学药，小分子化学药选择性差，会对正常细胞产生难以预期的毒性。单克隆抗体，简称单抗，对某一类细胞的选择性高，并可以在体内自然代谢，所以安全性相对较高，但单克隆抗体通常只能作用于细胞表面的靶点，因而经常只能起到抑制作用而并不能真正杀死癌细胞。

理想的药物就是把优异临床疗效的靶向特异性抗体和小分子药物药代动力学结合起来，这就是抗体－药物偶联物ADC。抗体-药物偶联物ADC是把具有细胞内吞作用的靶向特异性抗体和具有特定药理学特性，如细胞强毒作用的小分子化合物结合起来。即利用单克隆抗体把具有强烈毒副作用的毒素小分子化药靶向到肿瘤细胞，以期达到提高疗效，减少毒副作用。这项技术既克服了单抗药靶点可选性少，杀伤力差等缺点；同时又解决了小分子毒性高，代谢不稳定的问题。抗体-药物偶联物ADC因在血液中相对稳定，能有效地降低小分子细胞毒素化药本身对循环系统以及健康组织的毒性，是目前抗肿瘤领域的研究热点之一。

抗体-药物偶联物ADC在抗癌领域拥有广泛的发展空间，成为近年来抗肿瘤药物领域中最受关注的靶向药物，成功应用于临床的例子有治疗乳癌的曲妥珠单抗，治疗非霍奇金淋巴瘤的利妥昔单抗等。抗体－药物偶联物ADC药物的抗体部分为单链抗体，效应分子通常由放射性核素、药物或毒素片段等组成，以抗体为载体的免疫偶联物将效应分子带到肿瘤区域的靶细胞，进而以效应分子对靶细胞的选择性杀伤作用来治疗癌症，因而抗体-药物偶联物ADC药物被称为治疗恶性肿瘤的“生物导弹”。抗体－药物偶联物ADC药物中单克隆抗体部分的靶向作用和抗体所连接的效应分子对靶细胞的杀伤作用两者都是至关重要的。

在单抗新药的研发和改造中，分子影像学成为当今及其重要的研究手段，正电子发射断层显像immunopositron emission tomography，以下简称ImmunoPET。为近年来发展的新兴分子影像学技术，借助于其PET的高灵敏性和抗体高特意性的结合，可用于寻找和量化单抗，从而提供了一种量化分子靶标的方法，成为在疾病诊断中广泛使用的发展设计技术。

当前，抗体-药物偶联物ADC研发比较领先的公司主要有ImmunoGen和Seattle Genetics。ImmunoGen的主要技术是依靠抗体表面的Lysine将活性小分子和抗体连接起来制成ADC。这个技术的最大问题在于抗体表面有大量可以连接小分子的赖氨酸，这样就使得每次产生的ADC上一个抗体连接的活性小分子数量不能保持稳定。有的抗体搭载多达8个小分子，有的却很少，甚至没有。过多承载小分子的抗体会失去抗体本身的特性，而搭载不足的抗体又不能在癌细胞内部产生足够的致死浓度。Seattle Genetics的主要技术是依靠还原抗体配对的S-S键，然后依靠还原后的SH基团与连接物上的还原态的硫形成新的S-S键，从而将活性小分子和抗体连接起来制成ADC。他们的技术问题在于破坏了抗体原有的配对S-S键，使得抗体的稳定性大大降低，而且每次还原的抗体配对的S-S键数量不恒定，使得他们和ImmunoGen有同样的问题，每次产生的抗体-药物偶联物ADC上一个抗体连接的活性小分子数量不能保持一致。ADC药物中单克隆抗体部分的靶向作用和抗体所连接的效应分子对靶细胞的杀伤作用两者都是至关重要的。

目前缺乏一种在不影响抗体靶向性和功能性的前提下，突变改造的突变点不影响抗体可变区与抗原结合的活性；维持可结晶片段区的构象和功能；点突变位于抗体分子表面；突变在温和条件下即可连接链接物的抗体。

发明内容

本发明的目的是在不影响抗体靶向性和功能性的前提下，通过对抗体表面进行定点突变，从而控制连接活性小分子，突变在温和条件下即可连接连接物的用于构建放射性同位素偶联标记的ADC药物的改造抗体IgG1-CH-N267C。

为了实现上述技术目的，本发明提供的技术方案为：一种用于构建放射性同位素偶联标记的ADC药物的改造抗体IgG1-CH-N267C，包括