[发明专利]一种定点切割RNA的方法在审

专利信息
申请号: 201510098161.3 申请日: 2015-03-06
公开(公告)号: CN105713896A 公开(公告)日: 2016-06-29
发明(设计)人: 王星宇;王鹏飞;贾秀双 申请(专利权)人: 常州易顺生物技术有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 213000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 定点 切割 rna 方法
【权利要求书】:

1.一种定点切割RNA的方法,其特征在于:所述方法包括如下 步骤:

步骤一:设计与目的RNA互补的DNA序列,并且根据实际应用需 要在特定位置对其进行偶氮苯修饰;

步骤二:按照步骤一设计要求,合成具有偶氮苯修饰的DNA序列;

步骤三:引入RNaseH,并使其在偶氮苯修饰的DNA序列的引导 下,在指定区域或特异位点切割RNA。

2.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述步骤一具体如 下:设计同底物RNA互补的DNA序列,根据底物RNA分子的大小和需 要特异性剪切的位置来确定互补DNA的长短和需要进行偶氮苯修饰 的碱基;同时根据需要,进行不同程度的偶氮苯修饰,剪切的位点由 偶氮苯分子参入DNA序列的位置和数量来决定。

3.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述步骤二具体如 下:按照步骤一设计的DNA序列,在DNA合成仪上合成所需要的偶氮 苯修饰DNA序列,在需要的参入偶氮苯分子的位置使用负载有偶氮苯 的连接臂分子单体,将偶氮苯分子引入到碱基之间。

4.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述步骤三具体如 下:在步骤二合成修饰DNA结束以后,可以用合成的修饰序列引导 RNaseH对底物RNA进行特异性剪切。

5.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述连接臂分子单 体为D-苏氨醇、L-苏氨醇、1,3-丙二醇、甘油酸中的一种。

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