[发明专利]一种定点切割RNA的方法在审
申请号: | 201510098161.3 | 申请日: | 2015-03-06 |
公开(公告)号: | CN105713896A | 公开(公告)日: | 2016-06-29 |
发明(设计)人: | 王星宇;王鹏飞;贾秀双 | 申请(专利权)人: | 常州易顺生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 213000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 定点 切割 rna 方法 | ||
1.一种定点切割RNA的方法,其特征在于:所述方法包括如下 步骤:
步骤一:设计与目的RNA互补的DNA序列,并且根据实际应用需 要在特定位置对其进行偶氮苯修饰;
步骤二:按照步骤一设计要求,合成具有偶氮苯修饰的DNA序列;
步骤三:引入RNaseH,并使其在偶氮苯修饰的DNA序列的引导 下,在指定区域或特异位点切割RNA。
2.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述步骤一具体如 下:设计同底物RNA互补的DNA序列,根据底物RNA分子的大小和需 要特异性剪切的位置来确定互补DNA的长短和需要进行偶氮苯修饰 的碱基;同时根据需要,进行不同程度的偶氮苯修饰,剪切的位点由 偶氮苯分子参入DNA序列的位置和数量来决定。
3.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述步骤二具体如 下:按照步骤一设计的DNA序列,在DNA合成仪上合成所需要的偶氮 苯修饰DNA序列,在需要的参入偶氮苯分子的位置使用负载有偶氮苯 的连接臂分子单体,将偶氮苯分子引入到碱基之间。
4.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述步骤三具体如 下:在步骤二合成修饰DNA结束以后,可以用合成的修饰序列引导 RNaseH对底物RNA进行特异性剪切。
5.根据定点切割RNA的方法,其特征在于:所述连接臂分子单 体为D-苏氨醇、L-苏氨醇、1,3-丙二醇、甘油酸中的一种。
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