[发明专利]一种核酸分子低穿孔速度的纳米孔测序方法及其专用的纳米孔器件在审
申请号: | 201510104527.3 | 申请日: | 2015-03-10 |
公开(公告)号: | CN104694649A | 公开(公告)日: | 2015-06-10 |
发明(设计)人: | 赵清;俞大鹏;唐智鹏;鲁铂 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12M1/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;王春霞 |
地址: | 100000*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 分子 穿孔 速度 纳米 孔测序 方法 及其 专用 器件 | ||
1.一种核酸分子低穿孔速度的纳米孔测序方法,包括如下步骤:将待测的核酸分子加入到盛有电解液的纳米孔测序装置中,所述纳米孔测序装置包括:设有正极和负极的电解池以及分隔所述电解池正极和负极的一面覆盖有琼脂糖凝胶层的固态纳米孔薄膜;将所述核酸分子置于所述电解池的负极腔室;测定时,在正极和负极间施加电压,作为核酸分子穿孔的驱动电场。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述核酸分子为DNA、RNA或肽核酸。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:琼脂糖凝胶层的制备方法,包括如下步骤:将琼脂糖凝胶水溶液涂覆于所述固态纳米孔薄膜的一面上,所述琼脂糖凝胶水溶液凝固后即得所述琼脂糖凝胶层。
4.根据权利要求3中所述的方法,其特征在于:所述琼脂糖凝胶水溶液的质量百分浓度为0.5~2%,所述固态纳米孔薄膜上涂覆的所述琼脂糖凝层的厚度为10~100μm。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其特征在于:所述琼脂糖凝胶层均匀覆盖于所述固态纳米孔薄膜上。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法,其特征在于:所述固态纳米孔薄膜的纳米孔的直径为10~20nm,孔深为20~100nm。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于:所述电压为100~300mV;
所述电解液的摩尔浓度为0.1~3.2mol/L;
所述电解液的pH值为8~10。
8.权利要求1-7中任一项所述的方法的专用的纳米孔器件,它由固态纳米孔薄膜及其覆盖在所述固态纳米孔薄膜上的琼脂糖凝胶层组成。
9.根据权利要求8所述的纳米孔器件,其特征在于:所述固态纳米孔薄膜的纳米孔的直径为10~20nm,孔深为20~100nm;
所述琼脂糖凝胶层的厚度为10~100μm;
制备所述琼脂糖凝胶层使用的琼脂糖凝胶水溶液的质量百分浓度为0.5~2%。
10.一种纳米孔测序法中降低核酸分子穿孔速度的方法,包括用固态纳米孔薄膜分隔设有正极和负极的电解池;其特征在于:所述固态纳米孔薄膜上覆盖有琼脂糖凝胶层。
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