[发明专利]一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒

权利要求书

1.一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于包括：1)10×LAMP缓冲液；2)8000U/mL BstDNA聚合酶；3)10mM dNTPs；4)LAMP引物组：外引物浓度为5pmol/μL，外引物为F3和B3；内引物浓度为40pmol/μL，内引物为FIP和BIP；环引物浓度为20pmol/μL，环引物为LF和LB；5)无菌去离子水；6)荧光染料：10×SYBR Green I；7)阳性对照：肠炎沙门菌标准株ATCC13076基因组DNA；8)阴性对照：无菌去离子水。

2.根据权利要求1所述的一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于：所述的10×LAMP缓冲液含有200mM Tris-HCl(pH 8.8，25℃)、100mM氯化钾、100mM硫酸铵、20mM硫酸镁、8M甜菜碱和体积百分浓度为1％的曲拉通X-100。

3.根据权利要求1所述的一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于：所述的外引物F3和B3序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述的内引物FIP和BIP序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示，所述的环引物LF和LB序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

4.根据权利要求1所述的一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于：该试剂盒LAMP检测反应体系为：每25μL反应液中，5pmol/μL的F3和B3各1μL，40pmol/μL的FIP和BIP各1μL，20pmol/μL的LF和LB各1μL，BstDNA聚合酶1μL，10mmol/L的dNTPs 3.5μL，待检样品DNA2～3μL，无菌去离子水适量。

5.根据权利要求4所述的一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于：试剂盒采用荧光目视法时，反应体系中还包括10×SYBR Green I 2.5μL，反应体系总量保持25.0μL不变。

6.根据权利要求4所述的一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于：LAMP反应条件为：66℃恒温反应50min，并在80℃持续10min。

7.根据权利要求4所述的一种快速检测禽源样品中沙门菌的LAMP试剂盒，其特征在于：所述的沙门菌为鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌或肠炎沙门菌中的一种或几种。

8.一种用于检测沙门菌的通用LAMP引物组，其特征在于包括：外引物F3和B3；内引物FIP和BIP；环引物LF和LB。

9.根据权利要求8所述的一种用于检测沙门菌的通用LAMP引物组，其特征在于：所述的沙门菌为鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌或肠炎沙门菌中的一种或几种。

10.根据权利要求8所述的一种用于检测沙门菌的通用LAMP引物组，其特征在于：所述的外引物F3和B3序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述的内引物FIP和BIP序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示，所述的环引物LF和LB序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。