[发明专利]一种三七含量检测及优化提取纯化方法

权利要求书

1.一种三七含量检测及优化提取纯化方法，其特征在于，该三七含量检测步骤流程包括仪器药品与试剂的准备、标准曲线的制备、进行稳定性试验、进行精密度试验、进行重现性试验、进行回收率试验、计算分析得出结论；该优化提取纯化方法步骤流程包括利用热浸法进行提取、对大孔树脂进行预处理、用大孔树脂进行纯化、用洗脱剂洗脱、蒸馏干燥后成品。

2.如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法，其特征在于，所述的仪器药品与试剂的准备是指选择仪器药品与试剂，采用UV-2201分光光度计、三七总皂苷对照品、三七药材，浓硫酸、乙醇和甲醇均为分析纯。

3.如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法，其特征在于，所述的标准曲线的制备是指精密称取在60℃减压干燥至恒重的三七总皂苷对照品10.2mg，加甲醇稀释至100ml，制成对照品溶液，精密量取0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置于10ml容量瓶中，挥干溶剂，加人浓硫酸1ml，于80℃恒温水浴中加热反应1h，立即置于冰水中冷却5min，分别加甲醇稀释至10ml刻度，摇匀，放置30min，以试剂空白作对照，按照分光光度法，在276nm波长处测定吸光度(A)，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，各浓度(C)相应的吸光度(A)经统计处理，求得回归方程为：

A＝0.06531+0.03304C，r＝0.99960；

所述的进行稳定性试验是指精密吸取供试品溶液1.0ml，按照标准曲线制备项下操作，放置0，1，2，3，4，5，6h后测定，结果RSD为2.16％，表明供试品溶液在6h内稳定。

4.如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法，其特征在于，所述的进行精密度试验是指精密吸取三七总皂苷对照品溶液2.0ml，按标准曲线制备项下操作，测定吸光度，重复5次，RSD为0.83％，表明精密度良好；

所述的进行重现性试验是指平行取同一供试品5份，分别按样品测试条件测定，结果RSD为1.78％，重现性符合要求；

所述的进行回收率试验是指取已知含量的样品5份，精密称定，分别加入一定量的三七总皂苷对照品，按照标准曲线制备项下操作，分别测定，结果回收率为100.72％，RSD为2.05％。

5.如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法，其特征在于，所述的计算分析得出结论是指精密量取供试品溶液40密置10ml具塞试管中，于水浴中挥干溶剂，按照标准曲线制备项下方法自“加入浓硫酸1ml”起，依法测定吸光度，并用回归方程计算分析结果，得出结论：各因素对提取效果影响最大的是乙醇浓度，其次为热浸时间和热浸温度，乙醇用量在所考察的范围内影响最小，确定三七最优提取条件为：乙醇浓度80％，浸出时间160min，温度65℃，溶剂量为药材量的12倍。

6.如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法，其特征在于，所述的利用热浸法进行提取是指将三七粉碎为20～40目的粗粉，在75％乙醇中浸泡12h，在温度60℃下热浸提3次，每次浸提时间约1h，收集合并滤液，减压浓缩后进行真空干燥；

所述的对大孔树脂进行预处理是指由苯乙烯、二乙烯苯及致孔剂悬浮聚合，去致孔剂得到新树脂，新树脂含有杂质，必须经过前处理，否则产品中残留有害物质，会影响药品的安全性，用95％的乙醇处理后，再经5％的HCL和5％NaOH反复处理，蒸馏水洗至pH中性，有效去除有害杂质，挥去溶剂后保存备用；

所述的用大孔树脂进行纯化是指将稠膏粗制品水溶液加至已处理好的大孔树脂层析柱的上端进行纯化过程，大孔树脂使用量为原料量的2倍；

所述的用洗脱剂洗脱是指先用原料5倍量蒸馏水过柱，将产品中的多糖成分去除，至多糖反应呈阴性，弃去水洗脱液，再用20％乙醇原料5倍量洗脱，弃去洗脱液，最后用70％乙醇原料量10倍量洗脱，收集洗脱液；

所述的蒸馏干燥后成品是指将收集的洗脱液经旋转蒸发仪减压蒸馏，并回收乙醇，至样品呈稠膏状，将稠膏样产品真空干燥约5h，温度不超过60℃，真空度大于0.1MPa，得到提取物成品。